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Takara QuickCut Enzyme 总述

■ 制品说明
限制酶酶切反应在各种克隆相关实验中是一个比较费时的环节。通常,酶切需要一小时甚至过夜才能完成。Takara QuickCut Enzyme为DNA的快速切断提供了可能。所有的Takara QuickCut Enzyme都能够在随酶提供的两种Buffer即10×QuickCut Buffer和10×QuickCut Green Buffer中, 5~30 min内有效切断线性DNA、质粒DNA等,因此,多种限制酶可以在一个tube中同时完成DNA切断反应,既节省了反应时间,又避免了更换Buffer体系的繁琐操作。Takara QuickCut Enzyme是经过严格质量控制的高品质限制酶,是酶切实验的理想选择。下面图1和图2分别是使用Takara QuickCut Enzyme的单酶切和双酶切反应的实验例。
 
 
■ 特点
反应快速:只需5~30 min就可以完成酶切实验。
操作便捷:Buffer通用,并且可以直接电泳。
质量保证:经过Labeled Oligonucleotide Assay (LOA) 检测,保证纯度。
 
■ Labeled Oligonucleotide Assay (LOA)
Takara QuickCut Enzyme在原有Takara Restriction Enzyme质量控制的基础上引入了一种对核酸外切酶和内切酶更为灵敏的检测方法,即Labeled Oligonucleotide Assay (LOA) 检测,更大程度地保证了Takara QuickCut Enzyme的纯度,满足实验的需求。
LOA 检测主要用于检测酶和试剂溶液中是否含有核酸酶污染。Takara采用独特的两种荧光标记末端的寡核苷酸作为核酸酶检测的基质,基质中不含有限制酶的酶切位点,将Takara QuickCut Enzyme加入到这两种基质中,长时间孵育后进行变性凝胶电泳分离,然后采用荧光扫描仪进行两种波长的扫描,如果酶中含有核酸内切酶或核酸外切酶杂质,寡核苷酸就会被降解。通过扫描仪的特异性信号分析能够高灵敏地检测出是否有核酸酶杂质存在,而且能够基本定性是5’-exonuclease、3’-exonuclease或是内切酶的污染。经过严格的LOA检测,Takara QuickCut Enzyme都能够达到LOA检测基质降解率<10%的质量标准。
下图为LOA检测的合格品与不合格品的对比扫描图片,不合格品中的基质被明显降解,显示其中含有核酸酶杂质。
 

页面更新:2017-04-10 15:56:31