用Universal Buffer和Basal Buffer进行限制酶活性表示

机构用户解决方案

产品选择指南

PCR·等温扩增

PCR Enzyme的选择 PCR原理说明高成功率PCR优选酶：TaKaRa Ex Premier 高保真酶：PrimeSTAR系列基本PCR：Taq、Ex Taq、LA Taq系列无需提取的直接PCR：MightyAmp系列菌落PCR、预混染料的PCR酶等温扩增酶特殊用途：多重PCR，防污染等高端PCR酶（Clontech） DNA PCR相关制品 RT-PCR试剂盒具备反转录活性的PCR酶：TaKaRa Tth PCR仪器
定量PCR相关制品

qPCR套装 qPCR学习中心反转录反应（qPCR专用）反转录反应试剂(Clontech) 嵌合荧光法检测(Takara) 嵌合荧光法检测(Clontech) miRNA 嵌合荧光法检测探针检测 Cycleave探针检测 qPCR－仪器 qPCR Primer qPCR－RNA/DNA的制备
RNA合成·体外转录

RNA合成相关单品酶 RNA相关修饰酶 RNA合成模板制备 RNA合成试剂盒及解决方案 mRNA无细胞表达什么是mRNA生产用酶的质量等级？用于mRNA生产的酶（HQ级）用于mRNA生产的酶（GMP级）
cDNA合成 & 克隆

克隆学习中心 DNA Ligation TA克隆和平滑末端克隆 In-Fusion无缝克隆 cDNA合成&文库构建 SMART全长cDNA合成&文库构建 Random Mutagenesis Site-Directed Mutagenesis 基因组DNA序列调取试剂盒 Vector（克隆用）感受态细胞修饰酶/Ligases 修饰酶/磷酸酶、激酶修饰酶/DNA & RNA Polymerase 修饰酶/焦磷酸酶修饰酶/RTase、RNase Inhibitor 修饰酶/核酸酶、拓扑异构酶 Nucleotide Buffer（Powder）etc. 什么是mRNA生产用酶的质量等级？用于mRNA生产的酶（HQ级） Others（基因工程相关制品）
NGS相关制品

NGS 学习中心空间组学 mRNA-Seq Total RNA-Seq 单细胞 DNA-Seq DNA-Seq 生殖健康表观遗传学分析免疫库分析单细胞分选系统 NGS关联制品 PCR酶（NGS用）
自动化系统

自动化学习中心单细胞分选系统Shasta及其应用单细胞分选系统ICELL8 cx及其应用高通量Real-Time PCR系统高通量单细胞分选系统ICELL8应用
核酸提取、纯化及DNA标记

DNA片段、质粒DNA纯化基因组DNA纯化试剂(柱式法) 基因组DNA纯化试剂(试剂型) RNA提取、纯化试剂(柱式法) RNA提取、纯化试剂(试剂型) RNA保存试剂 Small RNA提取试剂病毒核酸纯化试剂盒酵母核酸纯化试剂盒核酸提取及纯化制品-Others DNA标记标记DNA-蛋白质的回收
限制酶

限制酶基本信息常规限制酶系列产品 QuickCut限制酶 RNA限制酶
电泳相关制品

核酸染料 DNA Markers RNA Markers 蛋白质Markers Agarose Loading Buffer 常用缓冲液方便装电泳相关装置
蛋白质互作研究（酵母杂交系统）

Takara酵母杂交学习中心 Matchmaker^® Gold酵母双杂系统 Matchmaker^® Gold酵母单杂系统互作的确认和评价 Matchmaker相关制品
表达调节及蛋白质性能分析

iDimerize^™蛋白质互作诱导系统 ProteoTuner^™蛋白质调节系统 Tet诱导表达系统
蛋白质表达相关制品

E.coli蛋白质表达 Brevibacillus/Bacillus蛋白质表达哺乳动物细胞蛋白质表达昆虫细胞蛋白质合成(Clontech) 无细胞蛋白质合成系统 Protein Refolding
蛋白质纯化、分析和检测

Capturem新型膜技术应用蛋白质样品制备 His标签融合蛋白质纯化 GST标签融合蛋白质纯化生物素标签融合蛋白质纯化 DYKDDDDK标签融合蛋白质纯化 Myc标签融合蛋白质纯化抗体纯化蛋白质IP&Co-IP 糖/磷酸化蛋白质纯化蛋白质检测蛋白质电泳胶染色蛋白质定量蛋白酶（His标签去除）蛋白酶（氨基酸序列分析）
基因导入（Virus、Vectors）

病毒基因传递系统选择向导重组慢病毒(Lentivirus)制品重组逆转录病毒(Retrovirus)制品重组腺相关病毒(AAV)制品重组腺病毒(Adenovirus)制品哺乳动物细胞用载体酵母、丝状真菌用载体植物用载体
转染试剂

Xfect转染试剂选择向导质粒转染试剂 RNA转染试剂 Protein转染试剂
干细胞研究相关制品

干细胞学习中心干细胞基因操作 (Cell reprogramming) 细胞 (Cell) 细胞培养产品 (Cell culture) 抗体 (Antibodies) 分化试剂盒和多能性监测 (Pluripotency and Differentiation )
表观遗传学相关制品

甲基化DNA富集相关制品 PCR/qPCR相关制品 Control Genome DNA 甲基化DNA相关酶制品亚硫酸氢盐处理相关制品
基因组编辑相关制品

CRISPR/Cas9 Cre重组酶基因敲入用长单链DNA制备
荧光蛋白质 & 报告系统

荧光蛋白质按颜色、名称分类荧光蛋白质按用途分类荧光蛋白质相关制品报告系统
抗体 & ELISA & 细胞信号转导

细胞增殖、细胞毒性测定细胞凋亡（Takara）细胞凋亡（Clontech） EIA试剂盒（Takara）免疫染色关联制品细胞信号转导（Clontech）酶活性测定试剂盒脂肪细胞、骨细胞分化试剂抗体（Takara）
细胞 & 培养相关制品

细胞培养相关制品细胞生物学检测试剂细胞解冻仪器
microRNA & RNAi研究相关制品

提取及纯化制品 microRNA定量PCR miRNA表达 Small RNA克隆 shRNA表达检测合成siRNA定量 RNAi相关制品
Library & cDNA & RNA

Human cDNA libraries series Rat cDNA libraries series cDNA、Genome DNA Total RNA & Poly A⁺ RNA
糖工学相关制品

糖工学酶糖工学试剂盒 Glycosphingolipid解析试剂
应用检测（食品-环境-人）

活菌DNA检测相关制品防污染相关制品食物中毒检测（PCR）食物中毒检测 (Real Time PCR) 食物中毒检测 (按Target选择) 肉种鉴定相关制品水质检测人感染症检测菌种鉴定支原体检测
仪器相关制品

PCR仪器支持中心 Q-PCR仪 E-PCR仪电泳仪器产品
Clontech相关组分信息表

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技术服务信息

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用Universal Buffer和Basal Buffer进行限制酶活性表示

Takara公司为了方便限制酶的统一使用，采用了通用缓冲液 (Universal Buffer) 测定限制酶活性的

体系(5种通用缓冲液中，用

标注的)，以此时的活性值作为100%。并把在其它通用缓冲液中的

相对活性表示如下表。有 ( ) 标记的是易受Star活性影响的缓冲液，为了避免Star活性的影响，希望

尽量使用

或

标注的缓冲液。每种限制酶都有其自身的基本缓冲液(Basal Buffer)，其中

Acc Ⅲ、BalⅠ、BcnⅠ、BglⅠ、Bpu1102Ⅰ、Cfr10Ⅰ、Eam1105Ⅰ、Eco52Ⅰ、NruⅠ、PshBⅠ、SnaBⅠ、SspⅠ、TaqⅠ、VpaK11B Ⅰ(共14种)由于没有十分合适的通用缓冲液，只能使用基本缓冲液(Basal Buffer)。各种限制酶的基本缓冲液组成不同，相互之间不能通用。各种限制酶在基本缓冲液中的相对活性也被列于下表，供参考。

限制酶在各种缓冲液中的相对活性

附带·活性测定用Buffer

推荐使用的Buffer

限制酶	相对活性（％）
限制酶	L	M	H	K	T+BSA	Basal^*1
Aat II	<20	<20	<20	<20	100	120
Acc I	20	100	<20	(<20)	160	80
Acc II	(260)	100	<20	20	200	160
Acc III	(<20)	(<20)	20	(80)	(<20)	100
Afa I	60	60	40	60	100	100
Afl II	20	40^*2	<20	<20	140	120
Alu I	100	100	<20	40	200	120
Aor13H I	<20	20	<20	80^*2	80	100
Aor51H I	80	100	<20	20	120	120
Apa I	100	<20	<20	<20	<20	120
ApaL I	100	20	<20	<20	120	120
Bal I	<10	<10	<10	<10	<10	100
BamH I	(40)	(60)	80	100	60	160
Ban II	(120)	(120)	100	80	(100)	100
BciT130 I	(<20)	(20)	80	100	(20)	100
Bcn I	<20	20	40	60	60	100
Bgl I	<20	<20	20	40	<20	100
Bgl II	<20	20	100	(100)	(60)	100
Bln I	<20	20	40	100	40	120
BmeT110 I	<20	<20	20	100	<20	140
BmgT120 I	<20	<20	100	40	<20	240
Bpu1102 I	<20	<20	<20	40	60	100
BspT104 I	100	60	<20	<20	100	120
BspT107 I	<20	20	80	100	20	100
Bsp1286 I	100	20	<20	<20	60	100
Bsp1407 I	20	60	20	20	100	100
BssH II	100	100	60	20	140	100
BstP I	(<20)	(60)	100	(100)	(100)	100
BstX I	<20	40	100	<20	<20	120
Bst1107 I	(<20)	60	100	100	40	100
Cfr10 I	(<20)	(<20)	(<20)	40	(20)	100
Cla I	40	100	60	100	60	100
Cpo I	<20	<20	80	100	<20	100
Dde I	40	60	60	100	80	80
Dpn I	60	60	120	140	100	100
Dra I	100	100	60	100	80	80
Eae I	60	100	<20	<20	120	160
Eam1105 I	(<20)	(40)	20	40	(40)	100
EcoO65 I	(20)	(60)	60^*2	40	40	100
EcoO109I	100	60	<20	<20	100	160
EcoRI	(20)	(100)	100	(120)	(80)	120
EcoRV	(<20)	(40)	100	(120)	(40)	100
EcoT14I	(<20)	(40)	100	120	(60)	100
EcoT22I	<20	20	100	(140)	(20)	120
Eco52I	<20	<20	<20	<20	<20	100
Eco81I	<20	100	<20	<20	100	160
Fba I	(<20)	(<20)	(80)	100	(20)	100
Fok I	(20)	(60)^*2	<20	<20	(200)	100
Hae II	80	100	<20	30	(200)	120

限制酶	相对活性(％)
限制酶	L	M	H	K	T+BSA	Basal^*1
Hae III	60	100	100	60	100	100
Hap II	100	60	<20	<20	100	80
Hha I	80	100	150	>300	150	80
Hinc II	20	100	20	40	>240	100
Hind III	(60)	100	<10	40	(100)	80
Hinf I	80	100	100	160	60	100
Hin1 I	40	80^*2	<20	20	60	160
Hpa I	<20	(40)	20	100	(80)	100
Kpn I	（100）	40	<20	<20	60	（140）
Mbo I	20	40	60	100	40	100
Mbo II	100	60	<20	<20	60	100
Mfl I	100	80	<20	<20	80	100
Mlu I	60	60	100	(100)	60	100
Msp I	40	40	<20	40	100	60
Mun I	(200)	100^*2	<20	<20	160	100
Nae I	100	<20	<20	<20	100	120
Nco I	(40)	(60)	20	20^*2	(60)	160
Nde I	<20	40	100	（100）	20	100
Nhe I	(120)	100	<20	<20	(160)	100
Not I	<20	20	100^*3	60	(<20)	60
Nru I	0	<20	20	20	<20	100
Nsb I	40	20	<20	60	100	100
PmaC I	100	80	<20	<20	100	100
PshA I	20	40	<20	100	60	160
PshB I	(20)	(40)	20	40	40	100
Psp1406 I	20	60	<20	<20	100	100
Pst I	(<20)	(60)	100	80	(20)	80
Pvu I	(<20)	(20)	(40)	80^*2	(40)	100
Pvu II	(80)	100	40	<20	(40)	100
RspRS II	80	100	100	100	100	100
Sac I	100	60	<20	<20	80	80
Sac II	40	20	<20	<20	100	40
Sal I	<20	<20	100	<20	<20	200
Sau3A I	(60)	80	100	<20	(80)	100
Sca I	(<20)	(<20)	100	(60)	(<20)	100
Sfi I	(40)	100	<20	<20	100	100
Sma I	<20	<20	<20	<20	100	100
Smi I	<10	<20	100	40	<10	100
SnaB I	(20)	(40)	<20	<20	(40)	100
Spe I	(80)	100	80	100	(80)	100
Sph I	(20)	(40)	100	120	(20)	100
Sse8387 I	(120)	60^*2	<20	<20	(60)	100
Ssp I	(<20)	(60)	40	(100)	(80)	100
Stu I	60	100	60	80	140	100
Taq I	20	80	20	60	80	100
Tth111I	(20)	80	40	100	(80)	120
Van91 I	<20	(20)	60	100	(60)	100
VpaK11B I	<20	<20	60	(40)	<20	100
Xba I	<10	50^*2	<10	<10	120	120
Xho I	<20	40	100	100	30	100
Xsp I	<20	60	<20	100	160	100

*1 每种限制性内切酶的基础缓冲液的组成不同
*2 ＋0.01％ BSA →100％
Afl II、Aor13H I、EcoO65 I、Fok I、Hin1 I、Mun I、Nco I、Pvu I、Sse8387 I、Xba I
*3 虽然单独使用H Buffer可以获得100%的相对活性，但添加0.01% BSA和0.01% Triton X-100进一步提高了酶在反应溶液中的稳定性

按Universal Buffer分类的限制酶

L	M	H	K	T+BSA
Afa I Alu I Aor51H I Apa I ApaL I	Acc I Acc II Afa I Afl II^1 Alu* I	Ban II Bgl II BmgT120 I BspT107 I BssH II	Afa I Aor13H I^1 BamH I Ban* II BciT130 I	Aat II Acc I Acc II Afa I Afl II
BspT104 I Bsp1286 I BssH II Dra I Eae I	Aor51H I BspT104 I Bsp1407 I BssH II Bst1107 I	BstP I BstX I Bst1107 I Cla I Cpo I	Bcn I Bln I BmeT110 I BspT107 I Bst1107 I	Alu I Aor13H I Aor51H I ApaL I Bcn I
EcoO109 I Hae II Hae III Hap II Hha I	Cla I Dra I Eae I EcoO109 I Eco81 I	Dra I EcoO65 I^1 EcoR I EcoR V Eco*T14 I	Cla I Cpo I Dde I Dra I EcoT14 I	Bpu1102 I BspT104 I Bsp1286 I Bsp1407 I BssH II
Hinf I Kpn I Mbo II Mfl I Mlu I	Fok I^1 Hae* II Hae III Hap II Hha I	EcoT22 I Hae III Hha I Hinf I Mbo I	Fba I Hae II Hae III Hha I Hind III	Cla I Dra I Eae I EcoO109 I Eco81 I
Msp I Nae I PmaC I Sac I Stu I	Hinc II Hind III Hinf I Hin1 I^1 Kpn* I	Mlu I Nde I Not I^2 Pst* I Sal I	Hinf I Hpa I Mbo I Msp I Nco I^*1	Hae II Hae III Hap II Hha I Hinc II

Mbo II Mfl I Mlu I Msp I Mun I^*1	Sau3A I Sca I Smi I Spe I Sph I	Nde I Nsb I PshA I Pst I Pvu I^*1	Hinf I Hin1 I Mbo II Mfl I Mlu I
Nhe I PmaC I Psp1406 I Pvu II Sac I	Stu I Taq I Van91 I VpaK11B I Xho I	Spe I Sph I Stu I Taq I Tth111 I	Msp I Mun I Nae I Nde I Nsb I
Sau3A I Sfi I Spe I Sse8387 I^1 Stu* I		Van91 I Xho I Xsp I	PmaC I PshA I Psp1406 I RspRS II Sac I
Taq I Tth111 I Xba I^1 Xho* I Xsp I			Sac II Sfi I Sma I Stu I Taq I
Taq I Tth111 I Xba I^1 Xho* I Xsp I			Xba I Xho I Xsp I

^*1+0.01%BSA ^*2+0.01%BSA+0.01%Triton X-100

各Universal Buffer的组成

■ 使用注意事项

缓冲液添加量为反应液的1/10。此外，10×T溶液中不含BSA，在使用时添加BSA，使其最终浓度为0.01%，有些限制酶(带有^*1或^*2标记)的反应体系中酶附带的BSA或Triton X-100是10倍浓度 (0.1%) 的液体，使用时请在反应体系中添加1/10量进行反应。

■ 保存

-20℃

反应停止液组份表

(10 × Loading Buffer)

0.9%	SDS
50%	Glycerol
0.05%	Bromophenol Blue

■ 使用方法

本公司的常规限制酶包装中全部附带有反应停止液。使用时请添加反应液量的1/10，即可停止反应，进行电泳。
在室温保存时，SDS会出现沉淀，请于温水浴中将其溶解后使用。

■ 保存

开封后室温保存。

页面更新：2024-03-11 08:26:00