我们使用cookie改善您的浏览体验并提供有意义的内容。请阅读我们的cookie协议
收藏我们 在线订购
     

机构用户解决方案

产品选择指南

技术服务信息

当前位置:首页> 产品选择指南 > 应用检测(食品-环境-人) > 菌种鉴定 > TaKaRa 16S rDNA Bacterial Identification PCR Kit
TaKaRa 16S rDNA Bacterial Identification PCR Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR176 TaKaRa 16S rDNA Bacterial Identification PCR Kit 50 Rxns ¥801
 
■ 制品内容 (50 次量)
PCR Premix* 500 μl × 3 支
PCR primers:  
      Forward primer (20 pmol/μl) 30 μl × 1 支
      Reverse primer1 (20 pmol/μl) 30 μl × 1 支
      Reverse primer2 (20 pmol/μl) 30 μl × 1 支
Seq primers:  
      Seq forward (10 pmol/μl) 20 μl × 1 支
      Seq internal (10 pmol/μl) 20 μl × 1 支
      Seq reverse (10 pmol/μl) 20 μl × 1 支
Positive Control DNA (1 ng/μl ) 10 μl × 1 支
16S-free H2O 1 ml × 3 支
   
* PCR Premix中含有TaKaRa Ex Taq、反应用Buffer、dNTP Mixture等,应尽量避免反复冻融。
 
 
■ 制品说明
本试剂盒是PCR扩增细菌16S rDNA的试剂盒,通过进一步对PCR扩增的DNA片段进行序列分析,可以鉴定被检测细菌的种类。细菌的rRNA是细胞内含量最多的RNA,约占RNA总量的80%以上,其分子量大,种类多,由高度保守区和可变区组成。细菌的rRNA包括5S、16S、23S,其中5S rRNA信息量少,不适合分析。23S rRNA尽管分子大,信息量多,但碱基突变速度较快,同样不适用于细菌鉴定。相比之下16S rRNA的遗传较为稳定,长度在1,550±200 bp左右,代表信息量适中,是研究系统进化的好材料。目前已经报道了10,000种以上的细菌16S rDNA序列。通过对16S rDNA的序列分析,可以将细菌划分到属或种。
16S rDNA可以通过PCR法扩增获得,由于16S rDNA的两端较为保守,可以在这段保守区域设计引物,扩增鉴定细菌的16S rRNA基因,然后进行DNA测序,再将其DNA序列与GenBank中的已知序列进行同源性比较后,可以判定检测细菌的种类。
本试剂盒中包含了进行细菌16S rDNA PCR扩增的所有试剂,同时还提供了三条测序用引物(正向测序引物Seq forward、反向测序引物Seq reverse、中间测序引物Seq internal)。PCR扩增引物可以扩增细菌16S rDNA前500 bp的DNA片段(Forward primer/ Reverse primer1),以及全序列的DNA片段(Forward primer/ Reverse primer2)。16S rDNA的前500 bp 序列变化较大,包含有丰富的细菌种属的特异性信息,进行DNA测序时一个测序反应即可测通,是一种较为经济便捷的16S rDNA鉴定方法;如果前500 bp序列不足以反映细菌的种属信息时,则可以进行16S rDNA的全序列PCR扩增及DNA测序,得到较为全面的16S rDNA序列信息。
对于难以培养、生化反应不明显及传统表型方法不能鉴定的细菌,使用本试剂盒鉴定未知细菌种类尤为方便。
 
■ 保存
-20℃保存,使用时请于冰中融化。
 
■ 注意事项
1. 操作注意。
① 本实验所使用的试剂极易污染,实验尽可能在超净工作台中进行。
② 实验人员应穿无细菌污染的实验服,戴口罩和手套,预先用70%乙醇对实验器具进行消毒等。
③ 实验应使用专用的仪器和耗材,例如:专用的微量移液器及配套的枪头。开启Microtube要小心,防止污染等。
2. PCR Premix 的使用方法。
   PCR Premix中含有TaKaRa Ex Taq,应尽量避免反复冻融。
3. 实验用细菌应为纯菌,以确保实验的可信度。