| 双链DNA的制备方法 | |||||||||||||||||||||
| 制备方法： | |||||||||||||||||||||
| 本工艺适用于Oligo DNA的再溶解，并互补配对形成双链Oligos 1. 开盖前进行离心，确保样品集中于容器底部。 2. 使用STE Buffer (10 mM Tris pH8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA) 溶解样品至合适的浓度。 |
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| 举例如下： | |||||||||||||||||||||
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| * 参考随样品附送的ODS (即Oligo Data Sheet)的样品摩尔数进行相应样品量的溶解Buffer加入体积的计算。 | |||||||||||||||||||||
| 3. 将二条链等体积混合。 4. 94℃保温5分钟。 5. 停止加热，自然冷却至室温。 6. -20℃保存。 |
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| 注意：为避免反复冻融，请分份进行保存。 | |||||||||||||||||||||
| 关于退火的说明： | |||||||||||||||||||||
| 1. | 两条或多条oligo进行退火时，即便序列理论上可以完全互补，但实际退火过程中由于oligo的Tm值、GC含量、二级结构、纯度、浓度差异等原因，并不一定能达到100%完全退火。并且在后期使用过程中，由于操作温度、buffer组分等原因，都可能造成退火产物有一定比例的双链分离。以上因素均有可能影响客户最终实验结果，请客户于使用前自行确认，本公司仅对单条oligo产品的序列、纯度等提供承诺，望请理解。 | ||||||||||||||||||||
| 2. | 本公司提供退火及退火精制服务： 退火样品：仅按照标准方法进行退火操作，并不承诺退火效果（退火效果取决于两条链的序列情况及Tm值等）。提供退火报告，但不对退火后的产物进行检测，无检测结果。产物中可能残留较多比例的单链未退火oligo； 退火精制样品：仅按照标准方法进行退火操作后，进行PAGE精制，纯化得到单一条带的双链退火产物。提供退火报告，报告中包含退火精制后的PAGE电泳结果。承诺提供的最终退火产物为PAGE级纯度，但产物中仍可能存在微量的单链未退火oligo。此外，如Tm较低时，退火产物在后续使用过程中，随环境温度的升高，会有相应比例的双链分离。 |
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页面更新：2019-08-30 13:15:44
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