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| ■ 制品内容 (25 μl反应×50 次量) |
| 2X Premix for Bovine*1 |
650 μl |
| Primer Mix for Bovine*2 |
50 μl |
| Probe Mix for Bovine*3 |
50 μl |
| dH2O |
1 ml |
| Control DNA for Bovine (104 copies/μl) |
15 μl |
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*1 2X Premix For Bovine中含有反应用dNTP Mixture、Buffer、酶等。
*2 Primer Mix for Bovine中含有扩增用引物及内参照 (Internal Control)。
*3 Probe Mix for Bovine中含有检测用探针，须避光保存。 |
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| ■ 制品说明 |
本制品是利用Real Time PCR技术快速检测牛*基因组DNA的试剂盒。采用双标记荧光PCR技术，根据线粒体DNA cytochrome c oxidase subunit I（COX I）基因上动物种间多态性的差异进行牛源性成分鉴定。应用多色荧光检测技术，对反应液中含有的两种不同荧光染料进行双通道同步检测，在同一反应管内对牛的COX I基因及内参照（Internal Control）同时进行扩增，并通过标记两种不同荧光物质（FAM、HEX）的特异性探针进行特异性杂交，实现多色荧光同步检测。其中对内参照反应的检测，可以监控反应是否正常进行，防止假阴性结果。制品中2X Premix for Bovine已经将DNA聚合酶、反应用Buffer、dNTP等试剂预混在一起。进行实验时，PCR反应液的配制十分简单。PCR反应用DNA聚合酶使用了Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Taq™ HS，与Takara精心研制的Real Time PCR用Buffer组合使用，可以有效抑制非特异性的PCR扩增，大大提高了PCR的扩增效率。本检测无需电泳，简单快速。本制品适用于食品、化妆品和饲料等样品中牛源性成分的鉴别。
本试剂盒（原Code No. D318）为《SN/T 2051-2008食品、化妆品和饲料中牛羊猪源性成分检测方法实时PCR法》附录B所述试剂盒。 |
| *：本制品经验证可对黄牛 (Bos taurus)、水牛 (Bubalus bubalis)、牦牛 (Bos grunniens) 进行检测，但由于检测品种不同，扩增序列可能存在变异，因此某些品种的牛可能无法被检出。另外，对于鸭（Duck）、鹅（Goose）、马（Horse）、猪（pork）、鸡（chicken）、兔（rabbit）、绵羊（Sheep）、山羊（Goat）、人（Human）、白尾鹿（White Tail Deer）、印度梅花鹿（Axis Deer）、火鸡（Turkey）和鸵鸟（Ostrich）等这些物种，添加genomic DNA 10 ng量时，无检出或有检出时但Ct值在35以上。（上述记载以外的物种没进行过确认。） |
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| ■ 保存 |
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| -20℃。 |
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| ■ 注意事项 |
1. 本试剂盒检测灵敏度高，为了防止污染，实验要分区操作。
① 第一区：反应液配制区。
② 第二区：样品制备区。
③ 第三区：样品添加区及反应检测区。
三个区之间必须进行物理性隔离，避免人为因素造成污染。
2. 2X Premix for Bovine制品融解后，请上下颠倒轻轻均匀混合，避免起泡，并经轻微离心后使用。
3. Probe Mix for Bovine应避光保存。
4. 配制Real Time PCR反应液时应避免强光照射。
5. 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等，尽量避免污染。 |
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| ■ 各物种检出结果例 |
| 物种 |
检测结果（Genome DNA 10 ng量添加） |
| 黄牛（Bos taurus） |
有检出 |
| 水牛（Bubalus bubalis） |
有检出 |
| 牦牛（Bos grunniens） |
有检出 |
| 鸭（Duck） |
有Ct值，但大于35圈 |
| 鹅（Goose） |
没有检出 |
| 马（Horse） |
没有检出 |
| 猪（Pork） |
有Ct值，但大于35圈 |
| 鸡（Chicken） |
没有检出 |
| 兔（Rabbit） |
没有检出 |
| 绵羊（Sheep） |
没有检出 |
| 山羊（Goat） |
没有检出 |
| 人（Human） |
没有检出 |
| 白尾鹿（White Tail Deer） |
有Ct值，但大于35圈 |
| 印度梅花鹿（Axis Deer） |
没有检出 |
| 火鸡（Turkey） |
没有检出 |
| 鸵鸟（Ostrich） |
没有检出 |
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| Note：上述表格记载以外的物种没进行过确认。 |
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