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TaKaRa qPCR Salmonella Detection Kit China Standard
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR264 TaKaRa qPCR Salmonella Detection Kit China Standard 40 Rxns ¥1,550
 
■ 制品内容 (25 μl反应×40次量)
Premix Ex Taq™ (Probe qPCR) (2X Conc.)*1 500 μl
ROX Reference Dye (50X Conc.)*2 20 μl
ROX Reference Dye II (50X Conc.)*2 20 μl
Salm P1 Primer (10 μM) 20 μl
Salm P2 Primer (10 μM) 20 μl
Probe for Salm (25X) 40 μl
Salm Positive Control (5×105 copies/μl)*3 30 μl
RNase Free dH2O 1 ml
 
*1 内含TaKaRa Ex Taq HS,dNTP Mixture,Mg2+, Tli RNaseH等。
*2 只使用在Life Technologies等的Real Time PCR扩增仪上,用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。StepOnePlus Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye,7500 Fast Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye II 。使用Thermal Cycler Dice™ Real Time System II 时不必添加。
*3 Salm Positive Control仅作为反应性能监测的对照,浓度仅供参考。实验时请使用阳性标本提取的DNA作为阳性对照。
 
 
【各种引物序列】
引物名称 引物序列
Salm P1 Primer 5′- CTCACCAGGAGATTACAACATGG -3′
Salm P2 Primer 5′- AGCTCAGACCAAAAGTGACCATC -3′
Probe for Salm 5′- FAM-CACCGACGGCGAGACCGACTTT-TAMRA -3′
序列参考《SN/T 1059.7-2010 进出口食品中沙门氏菌检测方法 实时荧光PCR法》。
 
■ 制品说明
沙门氏菌(Salmonella) 是重要的肠道致病菌,这一类细菌在自然界中分布很广,其中有2,500多种被确认为血清型。近年来由于Salmonella Enteritidis引起的食物中毒急剧增加。本试剂盒是根据中华人民共和国出入境检验检疫行业标准《SN/T 1059.7-2010 进出口食品中沙门氏菌检测方法 实时荧光PCR法》开发的用于定性检测沙门氏菌的Real Time PCR试剂盒。试剂盒中采用一种 2X浓度的Premix Type试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单。制品中的DNA聚合酶使用了改良后的Hot Start法用 DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS,与Takara精心研制的Real Time PCR用Buffer组合使用,可以有效抑制非特异性的PCR扩增,大大提高PCR的扩增效率,能进行高灵敏度的Real Time PCR扩增反应。本检测无需电泳,简单快速,灵敏度高、特异性强。
 
■ 保存
-20℃
注意: Premix Ex Taq(Probe qPCR)4℃保存(稳定性高达6个月)。
运输储存全程需要高度防污染。
收货后4℃保存。使用前轻轻颠倒以确保试剂完全溶解并充分混匀。
可在-20℃长期保存,一旦融解请于4℃保存,并在6个月之内使用完。
 
■ 注意事项
1. Real Time PCR扩增仪的使用请按照仪器说明书进行。
2. 判断为阳性的样品,要用微生物学方法进行再确认,参照SN0170。
3. PCR反应是灵敏度非常高的反应。为防止污染,建议从反应液的配制到检测的实验过程中,设定以下3个实验区域,并进行物理性隔离。
区域1:反应液的配制及分装。此时不要开闭装有扩增产物或检测样品的Tube管。
区域2:检测样品的制备。此时不要开闭装有扩增产物或检测样品的Tube管。
  区域3:向反应液中添加检测样品,进行反应、检出。
  由于本制品使用Real Time PCR法,扩增反应与检测同时进行,反应后的扩增产物不需要再进行电泳。为了避免污染,严禁从Tube管中取出扩增产物。
4. 本制品是使用Real Time PCR扩增仪对结果进行分析、判定。当Real Time PCR扩增仪的Auto功能不适合时,将会导致结果判定错误。此时可参照Real Time PCR扩增仪说明书进行手动设定。
5. 使用Premix Ex Taq (2X Conc.) 时,请上下颠倒轻轻混合均匀,避免起泡,经轻微离心后使用。试剂没有混匀时反应性能会有所下降,本制品不能用振荡器混匀。Premix Ex Taq (2X Conc.) 于-20℃保存时容易形成沉淀,此时,轻轻用手握一会儿或室温放置一段时间后,颠倒混匀可以完全融解。