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■ 制品内容*4 (Code No. MK500 20 次量) |
1. Labeling Safe Buffer |
500 μl × 2 |
2. TdT Enzyme*1 |
50 μl × 2 |
3. Anti-FITC HRP Conjugate*2 |
1.5 ml × 1 |
4. Control Slides*3 |
2 slides |
5. Permeabilisation Buffer |
1.0 ml × 2 |
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*1:TdT Enzyme是来源于E. coli的重组蛋白质。
*2:兔多克隆抗体。
*3:Control Slides是大鼠乳腺组织的石蜡包埋组织切片。作为阳性对照使用时,需要进行脱石蜡处理,请参照说明书中“操作方法,C. 石蜡包埋组织切片”的实验操作方法。在脱石蜡和Proteinase K处理后,请参考操作方法中的检测方法。
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4 每个组份可以单独购买
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(1)Labeling Safe Buffer(Code No. MK501) |
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500 μl×10 |
(2)TdT Enzyme(Code No. MK502) |
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50 μl×10 |
(3)Anti-FITC HRP Conjugate (Code No. MK503) |
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1.5 ml×5 |
(4)Control Slides(Code No. MK504) |
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2 slides×5 |
(5)Permeabilisation Buffer(Code No. MK505) |
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1.0 ml×10 |
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■ 制品说明 |
细胞凋亡(Apoptosis)是生命个体中的调控基因,为了维持个体生命,调控细胞进行新陈代谢,促使不需要的细胞或者具有危险性的细胞自我凋亡的现象,与细胞的生长、分化、生理现象(特别在免疫方面)有着密切关系。近期研究表明,细胞凋亡在癌细胞的发生过程中,或在放射线、热能等物理因素以及药物等化学因素对癌细胞生长的抑制、癌细胞的消失、癌细胞的分化诱导过程中都起着重要作用。因此,近期在癌症控制研究方面,细胞凋亡也为科研人员所广泛关注。
发生细胞凋亡现象的特征之一,是染色体DNA以核小体为单位(185 bp)进行DNA片断化,这些DNA片段可以通过DNA的末端标记法进行组织学检定。本试剂盒使用了TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)法,通过对in situ标记DNA片段的检测,可以有效地检定局部组织或单个细胞中的细胞凋亡现象。
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■ 保存 |
1、2、5: -20℃
3: 4℃(第一次融解后请于4℃保存)
4: 室温
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■ 试剂盒原理 |
TUNEL法利用TdT酶的作用,对凋亡细胞中的片断化DNA的3’-OH游离末端进行高效特异性标记fluorescein-dUTP,然后使用荧光显微镜或流式细胞仪直接进行观察。对掺入的fluorescein,同时也可以通过过氧化物酶标记的抗fluorescein抗体进行检出,与显色化学物质反应后可以使用光学显微镜进行观察。 |
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■ 试剂盒特性 |
1. 操作简便:使用Ready-to-Use型试剂。
2. 高灵敏度:可以单一检出初期的凋亡细胞。
3. 高特异性:与坏死细胞相比,能特异性染色凋亡细胞。
4. 使用灵活:可应用于组织切片、固定细胞等。
可使用荧光显微镜、光学显微镜等观察实验结果。
可以单独购买组份。
5. 高正确性:配有阳性对照,可以确认试剂盒的有效性及用于熟悉实验流程。
6. 高安全性:Buffer中不含危险试剂,如二甲砷酸钠。
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