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当前位置:首页> 产品选择指南 > 基因导入(Virus、Vectors) > 重组腺相关病毒(AAV)制品 > AAVpro® Cell & Sup. Purification Kit Maxi (All Serotypes)
AAVpro® Cell & Sup. Purification Kit Maxi (All Serotypes)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6676 AAVpro® Cell & Sup. Purification Kit Maxi (All Serotypes) 4 preps ¥7,580
Takara 6677 AAVpro® Cell & Sup. Extraction/Concentration Pack Maxi (All Serotypes) 1 Kit ¥4,683
Takara 6678 AAVpro® Purification Pack Maxi (All Serotypes) 4 preps ¥4,189
无标题文档
 
■ 制品内容
AAVpro Cell & Sup. Purification Kit Maxi (All Serotypes) (Code No. 6676)
AAVpro Cell & Sup. Extraction/Concentration Pack Maxi (All Serotypes) 6677
AAVpro Purification Pack Maxi (All Serotypes) 6678
 
AAVpro Cell & Sup. Extraction/Concentration Pack Maxi (All Serotypes)(Code No. 6677)
AAV Extraction Solution C 8 ml
AAV Extraction Solution D 32 ml
AAV Extraction enhancer 80 ml
Concentrating solution*1 115 ml×2
Dissolving solution 50 ml
 
AAVpro Purification Pack Maxi (All Serotypes)(Code No. 6678)
Precipitator*2 5 ml
Precipitator B 2.5 ml
Millex-HV 0.45 μm 4个
Amicon Ultra-15, 100 kDa 4个
Suspension Buffer 60 ml×2
Cryonase Cold-active Nuclease 500 μl
 
*1 Concentrating solution4℃保存时可能会产生沉淀,不影响制品的品质和性能。产生沉淀时, 请于40℃水浴中加热使其完全溶解后再使用。
*2 Precipitator A低温保存时可能会产生白色沉淀,不影响制品的品质和性能。产生沉淀时,请于37℃水浴中加热使其完全溶解后再使用。
 
■ 制品说明
用于同时从包装细胞和培养上清液中纯化AAV病毒
· 适用于各种AAV血清型
· 高纯度、高回收率
· 特别的AAV提取方法,不需要冻融或者超声波破碎等耗时操作
· 无需进行超速离心等繁琐操作
· 附带纯化AAV病毒所需要的所有Buffer
 
腺相关病毒(AAV)能够将基因导入至增殖细胞和非增殖细胞中,在非分裂细胞中可以实现长期表达。此外,由于它具有低免疫原性,也适合作为动物个体基因导入(in vivo transduction)工具。当使用AAV进行动物个体基因导入时,使用高纯度的病毒粒子是很有必要的,需要去除源自病毒包装细胞和培养基的杂质。在向培养细胞导入基因时,使用纯化后的AAV可以消除杂质所带来的影响。
 
AAV病毒的纯化通常使用氯化铯密度梯度超速离心法或碘克沙醇超速离心法,但这两种方法不仅需要熟练的操作手法,同时还存在耗时长和回收率低等问题。
 
AAVpro Cell & Sup. Purification Kit Maxi (All Serotypes)可在大约7小时内从包装细胞及其培养上清液中纯化AAV病毒,而且适用于各种血清型。该试剂盒中包含特别的AAV病毒提取方法,不需要像冻融法和超声波破碎法那样繁琐的操作。AAVpro Cell & Sup. Purification Kit Maxi (All Serotypes)(Code No. 6676)由AAVpro Cell & Sup. Extraction/Concentration Pack Maxi (All Serotypes) (Code No. 6677)和AAVpro Purification Pack Maxi(All Serotypes) (Code No. 6678)组成。本制品包含4次AAV病毒纯化所需要的缓冲液和纯化柱,每次可以纯化5个T225培养瓶收集的包装细胞和培养上清液中的AAV病毒。
 
■ 保存
AAVpro Cell & Sup. Extraction/Concentration Pack Maxi (All Serotypes)(Code No. 6677)
  Concentrating solution 4℃
  其它组份 室温
 
AAVpro Purification Pack Maxi (All Serotypes)(Code No. 6678)
  Cryonase Cold-active Nuclease -20℃
  其它组份 室温
 
■ 实验例
<1. 纯化后AAV纯度测定>
使用本制品,从5个T225培养瓶培养的包装细胞中纯化携带荧光蛋白质ZsGreen1的各血清型(AAV1、AAV2、AAV5、AAV6)AAV病毒。纯化后的AAV病毒使用AAVpro Titration Kit (for Real Time PCR) Ver.2(Code No. 6233)测定病毒滴度,以1× 109 vector genome (vg)/lane上样进行SDS-PAGE。结果显示,SDS-PAGE上的主要条带为AAV衣壳蛋白(VP1、VP2、VP3)。
 
 
2. 纯化后AAV载体感染性能评价
使用通过上述实验例「1. 提取纯化后AAV(各种血清型)纯度测定」获得的各种血清型AAV,感染293T细胞和HeLa细胞,评估其感染滴度。纯化后的AAV以50,000 vg/cell分别感染293T细胞和HeLa细胞,3天后进行流式细胞术分析。分析确认,使用本制品纯化的AAV依然保持其感染能力。
 
 
 

页面更新:2022-01-11 13:23:18

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