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产品选择指南

技术服务信息

AAVpro® Concentrator
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6674 AAVpro® Concentrator 1 Kit ¥3,285
无标题文档
 
 
AAV表达载体 AAV包装系统 293T包装细胞 AAV提取 AAV浓缩 AAV纯化 AAV滴度测定
 
 
■ 制品内容
该产品包含两种浓缩缓冲液和浓缩柱,用于从150 ml溶液中浓缩AAV载体
1. Concentrating solution A 16 ml
2. Concentrating solution B 80 ml
3. Dissolving solution 16 ml
4. Washing solution 30 ml×2
5. Millex-HV 0.45 μm 4 个
6. Amicon Ultra-15, 100 kDa 2 个
 
■ 制品说明
腺相关病毒(AAV)载体可用于将基因导入至任意分裂/非分裂细胞中,特别是可以在非分裂细胞中实现基因长时间表达。另外,它免疫原性低,适合作为动物个体基因导入(体内转导)工具。 不同动物个体AAV载体的剂量取决于目标动物类型和给药方法。如果研究对象是小鼠等,由于动物个体本身很小,给药剂量受限,因此制备高浓度AAV载体是非常有必要的。
 
在AAV载体制备和纯化的过程中,可能需要浓缩病毒颗粒或者置换缓冲液。
AAVpro® Concentrator是一种可以轻松高效地浓缩AAV载体的试剂,可用于多种目的,例如浓缩AAV载体培养上清液(有无血清均可)或者置换AAV载体溶液的缓冲液。
 
图1. 使用AAVpro Concentrator进行AAV载体浓缩的操作概览
 
■ 保存
Concentrating solution B:4℃
其它组分:室温
 
■ 其它设备(主要项目)
· 细胞培养所需的常规设备
· 自锁式注射器
 
■ 特点
· 适用于各种AAV血清型
· 高回收率
· 无需复杂操作过程
· 包括浓缩AAV载体所需要的全部缓冲液
· 浓缩效果不受有无血清的影响
 
■ 使用实例
实验例1:从无血清培养上清液中浓缩AAV载体
使用AAVpro Concentrator,将产生携带荧光蛋白质ZsGreen1的AAV1载体细胞培养上清液,从40 ml(1个T225培养瓶量)浓缩至200 μl。 然后,使用AAVpro Titration Kit (for Real Time PCR) Ver.2(Code No. 6233)测定滴度,并确认回收率。
 
 
实验例2:评估浓缩后AAV载体的感染性
使用浓缩前后的AAV1-ZsGreen1载体,感染HT1080细胞来评估感染性滴度。
以5,000 vg/细胞和500 vg/细胞的AAV载体感染HT1080细胞,并在3天后通过流式细胞术进行分析。结果证明,使用AAVpro Concentrator浓缩后的AAV载体仍然保持其感染性。
 
 
 
 

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