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无需Polybrene的慢病毒快速转导
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 631256 Lenti-X Accelerator 400 μl ¥4,245
Clontech 631257 Lenti-X Accelerator 1,000 μl ¥9,279
Clontech 631254 Lenti-X Accelerator Starter Kit Each ¥12,148
 
Lenti-X Accelerator是一项基于磁珠的技术,其作用是加快慢病毒转导实验速度。传统的慢病毒转导需要将细胞和病毒与Polybrene孵育过夜,但是Lenti-X Accelerator可以让您在30分钟内完成这个过程,并且避免使用Polybrene。带电荷的磁珠与慢病毒包装上清液中的病毒粒子结合,并在磁场作用下拉近并与细胞接触。
 
Lenti-X Accelerator非常适合转导慢病毒和MMLV逆转录病毒,包括MSCV逆转录病毒制剂。它是Polybrene敏感细胞类型的理想选择。Lenti-X Accelerator reagent (Code No.631256 & 631257)和Magnetic Separator for Cell Culture (Code No.631255)可以单独购买,也可以购买套装Lenti-X Accelerator Starter Kit (Code No.631254)。低滴度慢病毒样品在转导前可以使用Lenti-X Concentrator进行浓缩,提高病毒滴度。
 
我确实需要使用磁力分选器吗?
Lenti-X Accelerator磁珠足够大,即便不使用磁铁,单依靠重力也可进行转导。与Polybrene(过夜)相比,转导仍然是非常快速的(15分钟),然而使用磁力分选器可以将转导时间缩短至5分钟,并且转导效率可以提高10%。磁力分选器还可以轻松地从转导细胞培养板中去除磁珠-比如,胰蛋白酶消化后分离细胞,可以将细胞短暂暴露于磁铁,然后再将它们吸到另一个培养皿中。
 
概述/特点
· 使用磁珠仅需30分钟即可完成慢病毒转导
· 转导Polybrene敏感细胞类型的理想选择
· 转导前使用Lenti-X Concentrator浓缩低滴度慢病毒样品
 
应用
· 慢病毒和MMLV逆转录病毒,包括MSCV逆转录病毒制剂的转导
· 转导Polybrene敏感细胞类型
 
实验例
图1. Lenti-X Accelerator与Polybrene的转导作用对比。将结合了病毒的磁珠放置于磁场中,可大大提高单层细胞表面的局部病毒浓度。这样可以将预孵育后的转导时间缩短至5分钟,预孵育时间为20分钟,在这段时间中磁珠将与病毒进行结合,而使用Polybrene则需要转导过夜。加速转导也降低了敏感靶细胞在病毒上清液中的暴露时间。
 
图2. 使用Lenti-X Accelerator(25分钟)进行慢病毒转导要比使用Polybrene(16小时)快得多。使用表达ZsGreen1的慢病毒载体转染HT1080细胞。Lenti-X Accelerator磁珠(8 μl)与200 μl(approx. 1×106 total IFU)病毒上清液在室温下预孵育20分钟,然后添加到HT1080细胞中并放置在磁力分离器上孵育5分钟。同样也使用等量病毒、6 μg/ml Polybrene转导HT1080细胞5分钟或者过夜。37℃培养72小时后,使用流式细胞仪测定转导细胞数量。
 
图3. 磁力分离器适用于96孔、6孔、24孔、12孔细胞培养板
 
 
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