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Pfu N-acetyl Deblocking Aminopeptidase (Ac-DAP)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 7340 Pfu N-acetyl Deblocking Aminopeptidase (Ac-DAP) 50 μg ¥1,292
无标题文档
 
□ 比活性 >8 U/mg
□ 酶浓度 1 mg/ml
□ 贮存溶液  
     N-Ethylmorpholine-AcOH (pH 8.0) 50 mM
□ 5X 反应缓冲液
     N-Ethylmorpholine-AcOH (pH 8.0) 250 mM
     CoCl2 0.5 mM
 
■ 制品说明
Pfu N-acetyl Deblocking Aminopeptidase (Ac-DAP) 是一个特别的外切型氨肽酶,它能从蛋白质和肽的N末端上,依次水解释放酰基修饰基及后面的氨基酸,具有广泛的底物特异性。有些N末端被修饰的蛋白质或肽不能使用常规方法解析时,可以使用该酶对其N末端或N末端附近区域进行解析。由于通过基因工程方法对该酶的N末端进行了乙酰基保护,它的氨基酸序列不能用Edman 降解法解析。所以,即使E/S (酶/基质) 比较高时 (例如,E/S=1/2-1),目的蛋白质或肽的氨基酸序列也可被特异性地解析。
 
保存
-20℃。
一旦解冻,酶保存于4℃。酶和bufffer可在4℃稳定保存3个月。
 
■ 起源
Yeast carrying the plasmid which contains the gene encoding Pyrococcus furiosus DAP.
 
■ 反应性
从蛋白质和肽的N末端上依次水解释放酰基保护基及后面的氨基酸。但不能水解X-Pro结构的肽键。Co2+能显著提高本酶活性。
 
■ 活性定义
在75℃,pH 8.0 的条件下,1分钟水解1 μmol 的Leucine-p-nitroanilide所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。
 
■ 特性
分子量:38,639 (质谱)
        451,000 (通过沉降平衡方法)
激活剂:CoCl2
抑制剂:Amastatin,EDTA
最适pH:pH6.5 - 9.0
最适温度:85 - 95℃
热稳定性:经证实,酶在提供的缓冲液 (pH8.0,0.1 mM Co2+) 中50℃保温48小时后仍有100%活性。
 
■ 注意事项
本酶不能作用于具有高级结构的蛋白质,蛋白质样品需进行CM化等的化学方法变性处理。此外,本酶不作用于结合在PVDF膜上的蛋白质。