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■ 产品描述 |
Glycoprotein Enrichment Resin用于从血清当中富集糖基化蛋白质,在蛋白质组学研究中能够显著降低样品的复杂性。这种苯基硼酸类的树脂,可以在90 min内富集糖基化蛋白质,产品包装形式灵活,可用于重力流或FPLC纯化。 |
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Glycoprotein Western Detection Kit是Glycoprotein Enrichment Resin的辅助产品,用于在Western Blotting实验中对糖基化蛋白质选择性染色。试剂盒使用的是一种改良的过碘酸希夫法,对糖基化蛋白质的碳水化合物部分进行染色,产生有色条带。过碘酸希夫试剂针对的是存在于糖和唾液酸中相邻的二醇基,通常用作一般的糖蛋白染色剂。因此,本试剂盒的检测不依赖抗体,可以快速、灵敏地检测富集的糖蛋白。 |
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■ 原理 |
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Glycoprotein Enrichment Resin是一种硼酸基树脂,能够从复杂样品(例如人血清)中快速、有效、特异性地富集糖基化蛋白质,可以使用简单的重力流方法或中等压力的方法(例如FPLC)进行操作。树脂是偶联了间氨基苯硼酸配体的琼脂糖珠,该配体能够结合存在于糖蛋白分子糖部分内的残基如甘露糖、半乳糖或葡萄糖,与这些糖残基的顺式二醇基团形成可逆的五元环络合物。这种复合物可通过降低pH,或使用含Tris或山梨糖醇的洗脱buffer使其分离。 |
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■ 产品特点 |
灵活、有效、特异性的富集和检测糖基化蛋白质。 |
· 灵活——使用本树脂可以应用重力流法或FPLC法
· 性能出色——本树脂特异性结合糖蛋白能力更强,而非特异性结合很弱
· 特异性——本树脂对血清中的高、低丰度糖蛋白均能够有效富集
· 快速——90 min内即可完成糖蛋白的富集
· Western Detection Kit可提供快速(1 hr)、灵敏、特异性的不依赖抗体的检测 |
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■ 应用 |
糖蛋白的富集和检测 |
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■ 实验例 |
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通过Western Blotting对Glycoprotein Enrichment Resin纯化产物进行分析,结果显示,该树脂特异性地富集了高丰度和低丰度的血清糖蛋白。图A.使用IgG抗体检测到特异性富集的高丰度血清糖蛋白IgG,lane 1是人血清,lane 2是流穿液,lane 3是洗脱液(糖蛋白)。图B和C是通过Western Blotting对纯化得到的两种特异性的低丰度血清糖蛋白α-1酸性糖蛋白(图B)和α-1抗胰蛋白酶(图C)进行检测的结果,lane 1是人血清,lane 2是洗脱组分,lane 3是洗脱组分。 |
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