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Code No. |
产品名称 |
635616 |
Thiophilic-Superflow Resin |
635617 |
Thiophilic-Superflow Resin |
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■ 产品描述 |
使用嗜硫树脂进行抗体纯化是一种简单有效的方法,也是纯化免疫球蛋白最常用的方法,是Protein A法的经济替代品。尽管Protein A法纯化抗体很常用,但仍有一些种类的抗体,例如单链抗体IgE,IgY和IgM等不能用Protein A的方法纯化,因此嗜硫亲和层析(TAC)就可以作为一种替代方法,是此类抗体以及一般免疫球蛋白(包括IgG, IgM, IgA, Fab 和 Fc 片段, 以及C3和C4 补体因子)纯化的理想选择。 |
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TAC法可以简单有效地纯化蛋白质,特别适用于免疫球蛋白,可以代替Protein A从血清以及组织培养液中纯化抗体。与Protein A的免疫吸附相比,嗜硫吸附剂对免疫球蛋白有更广泛的亲和力。此外,使用嗜硫吸附剂能达到99%以上的总蛋白质回收率,而使用苯基和辛基琼脂糖吸附剂却只有92%和75%。 |
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TAC对广泛物种来源的不同类别和亚类的免疫球蛋白具有广泛的特异性,并且容量与其他亲和方法相似。其优点是样品制备简单,适用于各种来源的材料以及各种浓度表达的蛋白质,洗脱条件温和,不同于洗脱pH比较极端的Protein A/Protein G分离法,可能影响抗体的稳定性。 |
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■ 基本结构 |
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■ 产品特点 |
Thiophilic-Superflow Resin基于嗜硫亲和层析技术,通过砜硫醚配基吸附蛋白质。树脂对于不同蛋白质的吸附能力可以通过向混合物中加入不同的盐来操控,改变加入的盐浓度能够影响IgG, IgM, IgA, Fab 和 Fc 片段, 以及 C3和C4 补体因子的亲和吸附能力。
与Protein A法相比,使用Thiophilic-Superflow Resin用于免疫球蛋白纯化有如下优势: |
· 中性pH条件下纯化
· 选择性更广泛(IgY, IgM, IgE, scAb)
· 高线性流速
· 结合能力强(15-20 mg抗体/ml树脂)
· 可重复使用
· 纯化产物稳定性更高 |
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■ 应用 |
抗体纯化,包括IgG, IgM和鸡的IgY。 |
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■ Thiophilic-Superflow Resin的性质 |
性质 |
Thiophilic-Superflow Resin |
批量法/重力流 |
适用 |
FPLC |
适用 |
纯化规模 |
分析,制备 |
制备生产能力(mg IgG/ml树脂) |
25 |
基质 |
交联的6%琼脂糖 |
最大线性流速 (cm/min) |
5.0 |
最大体积流量 (ml/min)(5 x 1 cm 内径) |
4.0 |
pH稳定性 |
2-10 |
保存 |
4℃,不可冷冻 |
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■ 实验例 |
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使用Thiophilic Resin纯化单链抗体。上图为以下组分的SDS-PAGE结果:表达scFv215的细菌裂解液 (Lane 2),周质馏分 (Lane 3),Ni-NTA树脂的洗脱峰部分 (Lane 4),Thiophilic树脂的洗脱峰部分 (Lane 5). (Schulze, R. A. et al. (1994) Anal. Biochem. 220(1):212–214. Permission to reprint obtained.)。 |
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