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Capturem Trypsin (质谱级)
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Clontech 635737 Capturem Trypsin 96-Well Plate (Mass Spectrometry Grade) 1 × 96-Well Plate ¥5,462
Clontech 635736 Capturem Trypsin 96-Well Plate (Mass Spectrometry Grade) 4 × 96-Well Plates ¥19,500
Clontech 635739 Capturem Trypsin Activation Buffer 50 ml ¥588
Clontech 635740 Capturem Trypsin Miniprep Kit (Mass Spectrometry Grade) 20 Rxns ¥3,060
 
■ 产品简介
Capturem Trypsin能在室温下快速、高效并且完整的酶解消化蛋白质用于质谱分析,与需要4小时甚至过夜的传统蛋白质酶解消化操作流程相比,可以使蛋白质组学分析流程更加连贯、流畅。本制品基于新型Capturem 膜技术,膜上固定trypsin(猪胰腺来源,且经过还原甲基化修饰,稳定性和抗自溶能力都显著增强),有小型离心柱以及96孔板的形式可供选择,能在短短几分钟内完成独立或高通量样品的蛋白质酶解消化,不需要溶液法的长时间孵育(长时间孵育易造成蛋白质的氧化或非特异性修饰,最终导致鉴定困难并且重复性低),并且自溶片段很少,效率更高。此外,使用小离心柱或plate的方法操作速度快,更能避免溶液法易出现的过度酶解消化的情况。每个小离心柱或96 well plate的单孔最大上样量为80 μg的蛋白质或25 μg的抗体。
 
■ 产品特点
·操作快速,步骤简单,Miniprep产品4 min内即可在室温下酶解蛋白质样品,无需过夜处理
·比溶液法效率更高,酶解更彻底,且不易出现过度酶解
·Trypsin经过修饰稳定性更高,样品中自溶片段更少,蛋白质非特异性修饰几率更低
·可以使整个蛋白质组学分析流程更加连贯,实现更有效的肽和蛋白质的质谱鉴定
·有独立的小型离心柱和高通量的96 well plate形式可供选择,满足不同的实验需求
* 4 × 96-Well Plates包装的产品不包含Activation Buffer,需要搭配购买635739或自行配制,每个plate需要搭配使用25 ml Activation Buffer
 
■ 操作流程
 
Capturem Trypsin消化流程。 在用活化buffer激活Capturem Trypsin后,将天然状态或经变性处理的样品溶液(50-800 μl)加入孔中,通过2 min的离心使样品过柱。在柱上进行胰蛋白酶消化,随后肽片段再次进行2 min的离心洗脱。与传统溶液法需要过夜消化的时长相比,Capturem Trypsin进行完全的抗体消化仅需3-6 min。*本流程不包括变性/还原/烷基化的时间。
 
■ 产品应用
·蛋白质鉴定
·蛋白质组学分析
·质谱样品制备
·抗体鉴定
 
■ 实验例
 
在天然条件下用Capturem Trypsin消化80 μg的肌红蛋白(Apo)的HPLC图谱。由图可见,Capturem Trypsin酶解消化的产物具有很高的重复性。
 
对使用Capturem Trypsin消化的SILuLite进行定量。Trypsin离心法消化SILuLite可产生ng级别(1, 10, 50 ng)的可检测替代肽段。特异性肽段的AUCs具有线性相关性。
 
 
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