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产品选择指南

技术服务信息

Chaperone Plasmid Set
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 3340 Chaperone Plasmid Set 1 Kit ¥1,602
 
■ 制品内容
     Plasmid pG-KJE8 (10 ng/μl) 100 μl
     Plasmid pGro7 (10 ng/μl) 100 μl
     Plasmid pKJE7 (10 ng/μl) 100 μl
     Plasmid pG-Tf2 (10 ng/μl) 100 μl
     Plasmid pTf16 (10 ng/μl) 100 μl
   
【注意】本制品仅限用于科研目的,凡用于商业用途,须获得Takara公司授权许可。了解详细信息以及获取相关许可文件,请致电4006518761或邮件联络service@takarabiomed.com.cn
 
■ 贮存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
 
■ 制品说明
蛋白质的结构和功能分析是后基因组学领域面临的挑战之一,现已受到广泛关注。表达的大量重组蛋白质需要对其结构和功能进行测定,为了满足这一需求,便开发了多种表达系统。
大肠杆菌由于系统简单,在表达系统的选择上范围广泛,因此通常被用作蛋白质表达的宿主菌。但是,外源蛋白质在E.coli中表达时,常常出现表达的蛋白质形成包涵体或被蛋白酶降解的情况,原因大多是表达的蛋白质没能进行正确的折叠,这不利于研究蛋白质功能。
已证实,分子伴侣 (Molecular Chaperones) 或称伴侣蛋白参与蛋白质的折叠过程。为探究蛋白质的体内折叠机理,已投入了大量的研究工作。HSP Research Institute, Inc.在分子伴侣研究领域做出了显著的贡献。 本Chaperone Plasmid Set含有五种类型的质粒,每一种质粒都能有效表达不同类型的伴侣蛋白组,各伴侣蛋白组协同作用、共同参与蛋白质折叠。据报道,目的蛋白质与其中一种“Chaperone team”共同表达,便可增加可溶性蛋白质的回收率,而使用通常方法,由于包涵体的形成,这些表达蛋白质常常是不可回收的 (参见图1)。
图1. 伴侣蛋白对胞内蛋白质合成体系的作用
〈可使用大肠杆菌表达体系〉
伴侣蛋白质粒含有pACYC的复制起点和氯霉素抗性基因 (Cmr基因),通常应用在大肠杆菌表达体系中,与ColE1型、具有氨苄抗性 (Ampr) 筛选标记的表达载体共存。各伴侣蛋白质基因位于araB启动子或Pzt-1 (tet) 启动子下游,而目的基因处于lac或其它启动子的控制之下,目的蛋白质与伴侣蛋白可分别诱导表达。另外,质粒上也具备启动子必要的元件 (araC或tetR)。需注意的是该伴侣蛋白质粒不可以与含有氯霉素抗性基因的表达质粒共同使用。例如,常用的pET系列载体等可以使用E.coli BL21 (DE3) 作为宿主,却不可以使用E.coli BL21 (DE3) pLysS和E.coli BL21 (DE3) pLysE,因为它们分别包含了带有Cmr基因、pACYC复制起点的pLysS或pLysE质粒。
此外,可以考虑使用的宿主还有E.coli JM109。
 
质粒 伴侣蛋白 启动子 诱导物 抗性标记
 pG-KJE8   dnaK-dnaJ-grpE araB  L-Arabinose Cm
  groES-groEL Pzt-1  Tetracyclin
 pGro7   groES-groEL araB  L-Arabinose Cm
 pKJE7   dnaK-dnaJ-grpE araB  L-Arabinose Cm
 pG-Tf2   groES-groEL-tig Pzt-1  Tetracyclin Cm
 pTf16   tig araB  L-Arabinose Cm
表1:各质粒编码的伴侣蛋白质种类及诱导物
 
■ 保存
-20℃。
 
■ Chaperone Plasmid载体图谱
 
 
 
 

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