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DNA Topoisomerase I
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2240A DNA Topoisomerase I 100 U ¥371
Takara 2240B (A × 5) DNA Topoisomerase I 500 U ¥1,673
 
■ 制品内容 (Code No.: 2240A)
DNA Topoisomerase I (20 U/μl) 100 U
10X DNA Topoisomerase I Buffer 1 ml
0.1% BSA* 1 ml
   
* BSA在-20℃下易产生沉淀,应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。
 
■ 制品说明
DNA Topoisomerase I 催化4种反应:
1. 使环状超螺旋分子的超螺旋解开。
2. 在单链环状DNA分子内形成绳结 (Knotting) 和解开绳结 (Unknotting)。
3. 催化具有互补碱基序列的环状单链DNA形成双链闭环状DNA分子。
4. 2个环状双链DNA分子之中的一个存在DNA链的切口时,发生两个分子的连结反应 (Catenation) 或者逆反应 (Decatenation)。 本酶由于来源于小牛胸腺,与来源于原核生物的酶性质不同,即使在Mg2+不存在的条件下也显示活性。而且,原核生物由来的DNA Topoisomerase I 只作用负链的超螺旋分子,而本酶则能使正负两方的超螺旋分子均形成松散型。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Calf thymus
 
■ 活性定义
在37℃、30分钟内把0.5 μg/50 μl的超螺旋pBR322 DNA完全转换成松散型的酶的活性定义为1 unit。
 
■ 使用注意
pBR322 DNA和φX174 DNA的RF I (超螺旋分子) 用DNA Topoisomerase I 处理后电泳,胶中含溴乙锭 (EtBr) 时,反应前后DNA条带的位置不发生变化。这是因为由DNA Topoisomerase I作用而转换为松散型的DNA受EtBr的影响,再次变为超螺旋状态。因此,使用Topoisomerase I反应后,一般使用不含EtBr的琼脂糖凝胶电泳,电泳终了后再用EtBr染色。
 
 

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