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产品选择指南

技术服务信息

Exonuclease III
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2170A Exonuclease III 5,000 U ¥210
Takara 2170B (A × 5) Exonuclease III 5,000 U × 5 ¥951
 
■ 制品内容 (Code No.: 2170A)
Exonuclease III (200 U/μl) 5,000 U
10X Exonuclease III Buffer 1 ml
 
■ 制品说明
本酶具有作用于双链DNA的3’→5’外切酶活性。本酶对双链结构具有高度特异性,能降解平滑末端、3’凹陷末端及有切口的DNA,但是不能降解3’-突出末端。所以,可以用产生不同末端的限制酶通过双重降解 (Double digestion) 后,利用Exonuclease III的3’→5’的外切酶活性,从一端降解,得到互补的单链DNA和5’-P单核苷酸。
与BAL 31 Nuclease相比,本酶的碱基特异性较小,如在富含GC的位置上,由于反应停止的机率较低,可用于DNA的删除制作。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli BE257/pSGR 3
 
■ 活性定义
以限制酶处理的小牛胸腺DNA为底物,在37℃、pH8.0的条件下,30分钟内产生1 nmol酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。
 
■ 用途
1. 通过部分降解双链DNA片段,产生一部分单链DNA片段,作DNA聚合酶的底物。生成的DNA可用于双脱氧法序列分析。
2. 与单链特异性核酸酶 (S1 Nuclease或Mung Bean Nuclease) 合用制作DNA缺失片段。本酶对双链结构DNA具有高度特异性,对于双酶切DNA片段 (例如EcoR I-Pst I Fragment) 能制作单向 (EcoR I 方向) 缺失的DNA。
3. DNA-蛋白质相互作用分析。
 
■ 使用注意
1. 存放6个月以上应置于-80℃保存。
2. 该酶在性质上有这样一个特点:DNA即使具有3’突出末端,有时也因其末端及序列的不同而被作为底物降解。
例如:
一个碱基突出型 (Eam11051 I等)
二个碱基突出型 (Pvu I、Sac II等)
三个碱基突出型 (Sfi I等)
四个碱基突出型 (Apa I被确认,Ban II及BstX I也有可能)。
 
 

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