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产品选择指南

技术服务信息

T7 RNA Polymerase
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 2540A T7 RNA Polymerase 5,000 U ¥600
Takara 2540B (A × 5) T7 RNA Polymerase 5,000 U × 5 ¥2,850
无标题文档
 
■ 制品内容(Code No. 2540A)
T7 RNA Polymerase (50 U/μl) 5,000 U
10X T7 RNA Polymerase Buffer 1 ml
50 mM DTT 1 ml
 
■ 制品说明
本酶是噬菌体T7 DNA编码的酶,以含有T7启动子序列的双链DNA为模板,以NTP为底物,合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA。本酶对T7启动子序列具有高度特异性,不能识别其它生物来源的启动子。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 起源
Escherichia coli carrying the plasmid containing the gene for phage T7 RNA polymerase gene.
 
■ 性质
1. 分子量:约98,000。
2. 亚单位:单一的多肽。
3. 最适pH:pH8.0。
4. 辅因子:Mg2+(最适浓度:8 mM),还原剂 (5 mM DTT)。
5. 激活剂:2 mM亚精胺 (4 mM亚精胺与DNA形成共沉淀)。
6. 抑制剂:NEM(10-4 M)、PCMB(5×10-8 M)。
 
■ 活性定义
在37℃、pH8.0的条件下,1小时内使1 nmol的 [3H] GMP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。
 
■ 用途
1. 合成单链RNA。
2. 合成高标记RNA探针。
3. 合成siRNA前体。
4. 制作RNA剪接反应 (RNA Splicing) 的前体。
5. 以帽类似物 (Cap analog) 为引物,制作Capped mRNA。
 
■ 使用注意
1. 为了特定区域的有效转录,建议在其区域下游把模板DNA预先切成平端或5′突出末端。
2. 缓冲液中的亚精胺与核酸结合可能形成不溶物。建议最后加入模板DNA。
 
 

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