| 本酶是鼠伤寒沙门氏菌LT2的噬菌体SP6 DNA编码的酶，分子量为96,000。本酶以含有SP6启动子序列的双链DNA为模板，以NTP为底物，合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA对SP6启动子序列具有高度特异性，不能识别其它生物来源的启动子。 |
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| ■ 保存 |
| -20℃。 |
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| ■ 起源 |
| Escherichia coli carrying the plasmid containing the gene for phage SP6 RNA polymerase gene |
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| ■ 活性定义 |
| 在37℃、pH7.5的条件下，1小时内使1 nmol的 [3H] GMP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。 |
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| ■ 用途 |
1. 为Northern杂交以及Southern杂交制作高标记探针。
2. 制作RNA剪接反应 (RNA Splicing) 的前体。
3. 以帽类似物 (Cap analog) 为引物，制作Capped mRNA。
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| ■ 使用注意 |
1. 最适pH为7.5，需要Mg2+和还原剂的存在，添加BSA及亚精胺可提高酶的活性。
2. 最适反应温度为40℃ (此时酶活性为37℃时的130%)，当所用酶量不超过300 U/ml，模板量不超过0.1 mg/ml时与RNA的合成量呈正比例。
3. 为了特定领域的有效转录，建议在其领域下游把模板DNA预先切成平端或5′突出末端。
4. 缓冲液中所含亚精胺容易与核酸形成复合物产生不溶物，建议最后加入DNA模板。 |
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