本酶具有以下活性:
1. 5′-OH末端寡核苷酸的磷酸化及5′-P末端寡核苷酸的去磷酸化。
5′-OH + ATP→5′-P + ADP
2. 磷酸交换反应
5′-P + ATP + ADP←→5′-P + ADP + ATP |
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■ 保存 |
-20℃。 |
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■ 起源 |
Escherichia coli carrying the plasmid encoding T4 pse T gene |
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■ 活性定义 |
以Micrococcal Nuclease处理的小牛胸腺DNA为底物,在37℃,pH7.6的条件下,30分钟内使1 nmol的[γ-32P]ATP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。 |
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■ 用途 |
1. DNA及RNA 5′末端的标记。
2. 合成DNA接头 (Linker) 的5′末端磷酸化。
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■ 特性 |
1. 分子量:约140,000。
2. 亚基:四个亚基,分子量均为33,000,活性形式为四聚体。
3. 辅因子:反应需要Mg2+和SH试剂如DTT的参与。
4. 抑制剂:7 mM的磷酸、焦磷酸盐或磷酸钠能够抑制酶50%的活性,7 mM的硫酸铵抑制酶75%的活性。
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