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感受态细胞Takara Stable Competent Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 9132 Takara Stable Competent Cells 100μl × 10 ¥1,700
无标题文档
 
■ 制品内容
Takara Stable Competent Cells 100 μl × 10
pUC19 DNA (0.1 ng/μl) 10 μl
SOC media* 1 ml × 10
*SOC Media:     2%   Tryptone
 0.5%   Yeast extract
 10 mM   NaCl
 2.5 mM   KCl
  10 mM   MgSO4
10 mM   MgCl2
 20 mM   Glucose
 
■ 制品说明
Takara Stable Competent Cells通过破坏同源重组相关的遗传基因,来提高DNA的稳定性。因此,它适用于克隆不稳定的DNA,包括poly(A)序列和重复序列等。此外,由于本产品缺失T1噬菌体感染所需的fhuA遗传基因,因此对该噬菌体具有抗性。
推荐使用In-Fusion Snap Assembly Master Mix(Code No. 638943/638944/638947~638949)进行克隆。使用pUC类载体时,可利用β-半乳糖苷酶的α-互补性,通过X-Gal*分解,对菌落进行蓝白斑筛选。
*X-Gal:5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside
 
■ 细胞浓度
1-2×109 bacteria/ml
 
■ Genotype
F-,endA1,supE44,thi-1,recA1,relA1,gyrA96,p>hoA,ΔsbcCD,Φ80 dlacZΔM15fhuA(lacZYA-argF)U169(mrr-hsdRMS- mcrBC)mcrA,λ-
 
■ 保存
-80℃。
注意:如果未在-80℃下保存,转化效率将会降低。请使用附带的 pUC19对照质粒来确认保存细胞的转化效率。不能液氮保存。
 
■ 注意事项
· 请按需取用感受态细胞。转移时,请放入干冰/乙醇中。
· 可使用1.5 ml microcentrifuge tubes代替14 ml圆底tubes (BD Code 352059或352057等)(详见使用方法步骤2),但效率可能会降低。
· 使用100μl的感受态细胞时,加入的高纯度DNA样品不要超过 10 ng。否则转化效率会降低。当改变感受态细胞数量或tube类型时,适当调整反应条件。例如,当使用1.5 ml microcentrifuge tubes时,42℃温育60秒(详见使用方法步骤5.)。
· 培养时,请根据所用载体,将抗生素添加至培养基中。
· 当加入X-Gal时,按照以下操作进行:
将20 mg/ml X-Gal(溶解于二甲基甲酰胺)按200-300 μl/100 ml的比例加入到琼脂培养基中。
· 不建议将解冻的感受态细胞再次冷冻保存。
 
 

页面更新:2024-01-31 15:19:42