高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript II High Fidelity One Step RT-PCR Kit

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一般PCR相关制品

PCR Enzyme的选择 PCR原理说明 Takara优选酶多功能酶高保真酶：PrimeSTAR系列基本PCR：Taq系列 Powerful PCR：MightyAmp系列直接电泳的酶制品特殊用途：多重PCR，防污染等高端PCR酶（Clontech） DNA PCR相关制品 RNA PCR相关制品 PCR Subtraction相关制品 PCR仪器
等温扩增相关制品

等温扩增酶
定量PCR相关制品

qPCR学习中心 qPCR套装反转录反应（qPCR专用）反转录反应试剂(Clontech) 嵌合荧光法检测(Takara) 嵌合荧光法检测(Clontech) miRNA 嵌合荧光法检测探针检测 Cycleave探针检测 qPCR－仪器 qPCR Primer qPCR－RNA/DNA的制备
cDNA合成 & 克隆

克隆学习中心 DNA Ligation TA克隆和平滑末端克隆 In-Fusion无缝克隆 cDNA合成&文库构建 SMART全长cDNA合成&文库构建 Random Mutagenesis Site-Directed Mutagenesis 基因组DNA序列调取试剂盒 Vector（克隆用）感受态细胞修饰酶/Ligases 修饰酶/磷酸酶、激酶修饰酶/DNA & RNA Polymerase 修饰酶/焦磷酸酶修饰酶/RTase、RNase Inhibitor 修饰酶/核酸酶、拓扑异构酶 Nucleotide Buffer（Powder）etc. 用于mRNA生产的酶（HQ级） Others（基因工程相关制品）
NGS相关制品

NGS 学习中心单细胞 RNA-Seq 单细胞 DNA-Seq RNA-Seq DNA-Seq 生殖健康表观遗传学分析免疫库分析单细胞分选系统 NGS关联制品 PCR酶（NGS用）前代RNA-Seq/DNA-Seq制品
自动化系统

自动化学习中心高通量单细胞分选系统ICELL8 cx 及其应用高通量Real-Time PCR系统自动化NGS文库制备系统高通量单细胞分选系统ICELL8应用
核酸提取、纯化及DNA标记

DNA片段、质粒DNA纯化基因组DNA纯化试剂(柱式法) 基因组DNA纯化试剂(试剂型) RNA提取、纯化试剂(柱式法) RNA提取、纯化试剂(试剂型) RNA保存试剂 Small RNA提取试剂体液样品exosome提取试剂病毒核酸纯化试剂盒酵母核酸纯化试剂盒核酸提取及纯化制品-Others DNA标记标记DNA-蛋白质的回收
限制酶

限制酶基本信息常规限制酶系列产品 QuickCut限制酶 RNA限制酶
电泳相关制品

核酸染料 DNA Markers RNA Markers 蛋白质Markers Agarose Loading Buffer 常用缓冲液方便装电泳相关装置
蛋白质互作研究（酵母杂交系统）

Takara酵母杂交学习中心 Matchmaker^® Gold酵母双杂系统 Matchmaker^® Gold酵母单杂系统互作的确认和评价 Matchmaker相关制品
表达调节及蛋白质性能分析

iDimerize^™蛋白质互作诱导系统 ProteoTuner^™蛋白质调节系统 Tet诱导表达系统
蛋白质表达相关制品

E.coli蛋白质表达 Brevibacillus/Bacillus蛋白质表达哺乳动物细胞蛋白质表达昆虫细胞蛋白质合成(Clontech) 无细胞蛋白质合成系统 Protein Refolding
蛋白质纯化、分析和检测

Capturem新型膜技术应用蛋白质样品制备 His标签融合蛋白质纯化 GST标签融合蛋白质纯化生物素标签融合蛋白质纯化 DYKDDDDK标签融合蛋白质纯化 Myc标签融合蛋白质纯化抗体纯化蛋白质IP&Co-IP 糖/磷酸化蛋白质纯化蛋白质检测蛋白质电泳胶染色蛋白质定量蛋白酶（His标签去除）蛋白酶（氨基酸序列分析）
基因导入（Virus、Vectors）

病毒基因传递系统选择向导重组慢病毒(Lentivirus)制品重组逆转录病毒(Retrovirus)制品重组腺相关病毒(AAV)制品重组腺病毒(Adenovirus)制品哺乳动物细胞用载体酵母、丝状真菌用载体植物用载体
转染试剂

Xfect转染试剂选择向导质粒转染试剂 RNA转染试剂 Protein转染试剂
干细胞研究相关制品

干细胞学习中心干细胞基因操作 (Cell reprogramming) 细胞 (Cell) 细胞培养产品 (Cell culture) 抗体 (Antibodies) 分化试剂盒和多能性监测 (Pluripotency and Differentiation ) 基因编辑（Gene Editing）
表观遗传学相关制品

甲基化DNA富集相关制品 PCR/qPCR相关制品 Control Genome DNA 甲基化DNA相关酶制品亚硫酸氢盐处理相关制品
基因组编辑相关制品

CRISPR/Cas9 Cre重组酶基因敲入用长单链DNA制备
荧光蛋白质 & 报告系统

荧光蛋白质按颜色、名称分类荧光蛋白质按用途分类荧光蛋白质相关制品报告系统
抗体 & ELISA & 细胞信号转导

细胞增殖、细胞毒性测定细胞凋亡（Takara）细胞凋亡（Clontech） EIA试剂盒（Takara）免疫染色关联制品细胞信号转导（Clontech）酶活性测定试剂盒脂肪细胞、骨细胞分化试剂抗体（Takara）
细胞 & 培养相关制品

细胞培养相关制品细胞生物学检测试剂细胞解冻仪器
microRNA & RNAi研究相关制品

RNA合成提取及纯化制品 microRNA定量PCR miRNA表达 Small RNA克隆 shRNA表达检测合成siRNA定量 RNAi相关制品
Library & cDNA & RNA

Human cDNA libraries series Mouse cDNA libraries series Rat cDNA libraries series cDNA、Genome DNA Total RNA & Poly A⁺ RNA
糖工学相关制品

糖工学酶糖工学试剂盒 Glycosphingolipid解析试剂
应用检测（食品-环境-人）

活菌DNA检测相关制品防污染相关制品食物中毒检测（PCR）食物中毒检测 (Real Time PCR) 食物中毒检测 (按Target选择) 肉种鉴定相关制品水质检测人感染症检测菌种鉴定支原体检测
仪器相关制品

PCR仪器支持中心 Q-PCR仪 E-PCR仪电泳仪器产品
Clontech相关组分信息表

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技术服务信息

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高保真RT-PCR试剂盒PrimeScript^™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit
品牌	Code No.	产品名称	包装量	价格（元）	说明书	数量
Takara	R026A	PrimeScript^™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit	50 Rxns	￥1,857
Takara	R026B (A × 4)	PrimeScript^™ II High Fidelity One Step RT-PCR Kit	50 Rxns × 4	￥6,703

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■ 制品内容 (Code No.: R026A)

PrimeScript II RT Enzyme Mix	50 μl
PrimeSTAR GXL for 1 step RT-PCR	200 μl
2 × One Step High Fidelity Buffer	625 μl × 2
Control F-1 Primer^*1 (20 μM)	10 μl
Control R-1 Primer^*2 (20 μM)	10 μl
Positive Control RNA (2×10⁵ copies/μl)	20 μl
RNase Free dH2O	625 μl × 2

1 Positive Control RNA用上游引物。 2 Positive Control RNA用下游引物。

图1. Control RNA: 使用Control Primer时扩增的DNA片段

■ 制品说明

PCR（Polymerase Chain Reaction；聚合酶链式反应）是一种使用两种引物扩增目的DNA的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA，RNA不能直接被扩增，但是经过反转录酶的作用将RNA反转录成cDNA后扩增（RT-PCR），PCR法便可应用于RNA的解析了。目前，此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
PrimeScript II High Fidelity One Step RT-PCR Kit是在一个反应管中连续进行反应的1 step RT-PCR用试剂盒。反转录酶使用延伸性能好且能够合成全长cDNA的PrimeScript II RTase，PCR使用准确性高且适于扩增长链及GC Rich cDNA的PrimeSTAR^® GXL DNA Polymerase，这两种酶经优化后可用于1 step RT-PCR。
本试剂盒可用于宽泛浓度RNA起始的反应，在反转录反应10分钟、PCR反应延伸时间为10秒/kb的高速条件下，能够扩增难扩增的长链及GC rich等各种目的基因，可简便快速且准确地获得cDNA产物。

本试剂盒具有以下优点：
· 使用单管反应，降低污染的风险，可准确且简便地扩增RNA起始的目的基因。
· 反转录反应只需10分钟，PCR延伸时间达10秒/kb的高速反应。
· 可扩增GC rich、长链cDNA。
· 反应中total RNA的使用量范围广，易于使用。
本试剂盒含有RNA起始合成cDNA及经PCR扩增cDNA所需的全部试剂。

■ 保存

-20℃。

■ 试剂盒特点

RNA模板	适用于所有RNA
扩增片段大小	～8 kb
反转录酶	PrimeScript II RTase (使用温度45℃)
DNA Polymerase	PrimeSTAR GXL for 1 step RT-PCR
RNase Inhibitor	必须使用 (PrimeScript II RT Enzyme Mix 中含有)
1st strand cDNA合成用引物	使用特异性下游引物 (PCR扩增反应用反义链引物) (不可使用 Random 6 mers 及 Oligo dT Primer)
操作	在一个反应管中连续的进行RT-PCR反应

■ 使用注意

以下为使用本试剂盒时的注意事项，使用前一定认真阅读。

1. 当同时需要进行多个RT-PCR 反应时，应先配制各种试剂的混合液（Master Mix；其中包括 RNase Free dHH2O、Buffer、dNTP Mixture 等），然后再分装到每个反应管中。这样，可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
2. 使用PrimeScript II RT Enzyme Mix、PrimeSTAR GXL for 1 step RT-PCR等酶类产品时，应轻轻混匀，避免起泡；分取之前要小心地离心收集到反应管底部；由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。
3. 2 × One Step High Fidelity Buffer使用前需充分vortex后，离心备用。
4. 酶制品应在实验前才从-20℃中取出，使用后也应立即放入-20℃保存。
5. 为了防止Positive Control RNA分解，应尽量避免反复冻融，建议将其分成小包装后冻存。有条件的实验室最好保存于-70℃～-80℃。
6. 分装试剂时务必使用新的枪头（Tip），以防止样品间污染。
7. 本试剂盒的反转录反应使用基因特异性引物。不要使用Random Primer或Oligo-dT Primer。

页面更新：2023-11-01 16:33:03

技术信息

操作方法

标准流程（Code No. R026A/B）

实验案例

扩增片段长度的确认（Code No. R026A/B）检出灵敏度的测定（Code No. R026A/B）