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BcaBEST RNA PCR Kit Ver.1.1
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara RR023A BcaBEST RNA PCR Kit Ver.1.1 100 Rxns ¥1,200
Takara RR023B (A × 2) BcaBEST RNA PCR Kit Ver.1.1 100 Rxns × 2 ¥2,300
无标题文档
 
 
RNA提取试剂 RT-pcr试剂 DNA Markers PCR仪器
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR023A : 100次量*1)
BcaBEST Polymerase (22 U/μl) 50 μl
RNase Inhibitor (40 U/μl) 25 μl
Random 9 mers (50 μM) 50 μl
Oligo dT Primer (50 μM) 50 μl
RNase Free dH2O 1 ml
Bca-Optimized Taq (5 U/μl) 25 μl
2 × Bca lst Buffer 1.25 ml × 2 支
5 × Bca 2nd Buffer 800 μl
dNTP Mixture (各10 mM) 50 μl
MgSO4 (25 mM) 500 μl
Control F-1 Primer*2 (20 μM) 25 μl
Control R-1 Primer*3 (20 μM) 25 μl
Positive Control RNA (2 × 105 copies/μl) 25 μl
   
*1 反转录反应10 μl,PCR反应体系50 μl,可使用100次。
*2 Positive Control RNA用上游引物。
*3 Positive Control RNA用下游引物。
 
■ 制品说明
PCR(Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应)是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA,RNA不能直接被扩增,但是经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA后,PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。
本试剂盒含有从RNA反转录到cDNA以及扩增此cDNA所必需的全部试剂,即用Bacillus caldotenax来源的BcaBEST Polymerase从RNA合成cDNA,然后在同一试管内加入应用LA PCR技术研制的Bca-Optimized Taq扩增此cDNA。此外,使用BcaBEST Polymerase进行反转录反应的最适温度是65℃,所以对具有复杂二级结构的RNA特别适合。
 
■ 各种引物的序列
引物名称 各引物序列
Random 9 mers   5′-NNNNNNNNN-3′
Oligo dT Primer   包含Takara特别设计的dT区域。本序列与TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver.3.0(Code No. RR019A/B)及TaKaRa RNA LA PCR Kit(AMV)Ver.1.1(Code No. RR012A)中的Oligo dT-Adaptor Primer的序列不同,没有M13 Primer M4区域。
Control F-1 Primer   5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′
Control R-1 Primer   5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′
 
■ 试剂盒的原理
 
BcaBEST RNA PCR的原理图
 
■ 试剂盒特点
RNA模板
  适用于所有RNA (对富含GC的mRNA及具有复杂二级结构的mRNA特别有效)
扩增片段大小
   5 kb以下
反转录酶
   BcaBEST Polymerase (最适温度65℃)
DNA聚合酶
   Bca-Optimized Taq
RNase Inhibitor
   必须使用 (试剂盒中含有)
合成cDNA第一条链的引物
  Random 9 mers、Oligo dT-Adaptor Primer或 特异性下游PCR Primer 可供选择
操 作
   在同一反应管中进行 (反转录酶在进行PCR反应前须进行高温失活)
 
 

页面更新:2019-12-23 14:28:52

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