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TaKaRa PCR Amplification Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara R011 TaKaRa PCR Amplification Kit 100 Rxns ¥514
无标题文档
 
■ 制品内容 (100 μl PCR×100次或50 μl PCR×200次)
TaKaRa Taq*1 (5 U/ μl) 50 μl (250 U)
dNTP Mixture*2 (各2.5 mM) 1.28 ml
10 × PCR Buffer (Mg2+ plus)
        100 mM  Tris-HCl(pH8.9)
        500 mM  KCl
        15 mM   MgCl2
1 ml

10 × PCR Buffer (Mg2+ Free)
        100 mM  Tris-HCl(pH8.9)
        500 mM  KCl

1 ml
MgCl2 (25 mM) 1 ml
Control Template (1 μg/ml λ DNA) 100 μl
Control Primer 1*3 (20 pmol/μl) 50 μl
Control Primer 2*3 (20 pmol/μl) 50 μl
Control Primer 3*3 (20 pmol/μl) 50 μl
λ-EcoT14 I Marker*4 (100 ng/μl) 40 μl
6 × Loading Buffer*5 1 ml
   
*1 TaKaRa Taq酶说明 (5 U/μl)
    【酶贮存液】
    20 mM Tris-HCl(pH8.0),100 mM KCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,0.5% Tween20,0.5% NP-40,50% Glycerol。
    【活性定义】
    用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃、pH9.3、30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位 (U)。
    【Reaction mixture】
    25 mM   TAPS (pH9.3,25℃)
    50 mM   KCl
    2 mM   MgCl2
    0.1 mM   DTT
    200 μM   each dATP·dGTP·dCTP
   100 μM   [3H]-dTTP
    0.25 mg/ml   activated salmon sperm DNA
 
*2 dNTP Mixture (各2.5 mM)
    dNTP Mixture无需稀释,可直接用于PCR。
    Form:溶于水 (钠盐),pH7-9
    纯度:每种dNTP≥98%
 
*3 Control Primer序列
       Control Primer 1       5'-GATGAGTTCGTGTCCGTACAACT-3'
       Control Primer 2       5'-CCACATCCATACCGGGTTTCAC-3'
       Control Primer 3       5'-GGTTATCGAAATCAGCCACAGCGCC-3'
     * 使用Control Primer 1、2时,可以扩增Control Template (λ DNA)的6,012 bp DNA片段。使用Control Primer 1、3时,可以扩增Control Template (λ DNA)的500 bp DNA片段。
 
*4 λ-EcoT14 I Marker
    此marker是用限制性内切酶EcoT14 I分解λcl857 Sam7 DNA得到的。由DNA片段19,329 bp;7,743 bp;6,223 bp;4,254 bp;3,472 bp;2,690 bp;1,882 bp;1,489 bp;925 bp;421 bp;74 bp等组成。由于λ DNA分解的末端片段与COS end相连,需加热处理(60℃,5 min.)。
 
*5 6×Loading Buffer的组成
36%   甘油  
30 mM   EDTA  
0.05%   溴酚兰  
0.035%   二甲苯青  
 
 
■ 制品说明
PCR Amplification Kit适用于各种DNA模板的PCR扩增。本试剂盒含有λ DNA作为对照模板以及扩增λ DNA目的序列用的对照引物 (6,012 bp,500 bp) 。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 使用注意
以下为使用本试剂盒时的注意事项,使用前一定认真阅读。
1. 试剂盒中的各组份,要仔细混匀后使用,但TaKaRa Taq要避免剧烈操作。
2. 因为样品DNA的提取方法不同,10×PCR Buffer (Mg2+ plus)中的Mg2+浓度可能并非最适浓度,此时可使用10×PCR Buffer (Mg2+ Free)和MgCl2,调整PCR反应液的适合的Mg2+浓度。
 
 

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