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■ 制品内容 (Code No.: RR350A) |
SapphireAmp Fast PCR Master Mix |
1 ml × 4 |
dH2O |
1 ml × 4 |
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■ 制品说明 |
SapphireAmp Fast PCR Master Mix是适合于快速PCR (延伸速度为10 sec./kb) 反应用试剂 (酶、Buffer、dNTP Mixture等) 的2倍浓度的预混型制品,DNA Polymerase使用了性能良好的Hot Start酶。并且,本制品中已含有电泳时所必需的色素试剂 (迁移速度不同的两种蓝色色素),PCR反应后可以直接进行电泳。使用本制品时,只需要在制品溶液中加入模板和引物便可以进行PCR反应,PCR反应结束后即可直接电泳观察结果,简化了操作步骤。
使用本制品直接进行菌落PCR检测插入片段 (推荐扩增低于5 kb片段),短时间内可以得到实验结果 (5 kb片段扩增所需时间约为1小时15分钟) 。以人基因组DNA为模板可以扩增6 kb的DNA片段。
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预变性说明如下:
※ 当对长片段或富含GC序列等复杂的模板进行扩增时,如有必要,可进行94℃ 1 min的预变性处理 (过度热处理可能会导致PCR酶失活)。 |
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■ 保存 |
-20℃ (4℃可以保存3个月)。
反复冻融活性可能降低,使用频率高时,融解后请于4℃保存,使用前颠倒混匀,轻轻离心后使用。 |
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■ 用 途 |
1. PCR法扩增DNA。
2. 菌落直接PCR。 |
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■ 电泳时色素Marker位置 |
反应液5 μl,1% TaKaRa Agarose L03 [TAKARA] (Code No. 5003/5003B) 电泳时,两种蓝色色素分别在1 kb和3~5 kb附近,分别在260 nm和620 nm处有吸收峰。如果需要,可通过使用NucleoSpin® Gel and PCR Clean-up (Code No. 740609.50/.250)或切胶回收来去除染料进行DNA纯化。 |
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■ PCR产物 |
使用本制品扩增得到的PCR产物3’端附有一个“A”碱基,因此可直接克隆于T-Vector中。也可以在末端平滑化和磷酸化后克隆到平滑末端载体。 |
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Technote: |
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