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机构用户解决方案

产品选择指南

技术服务信息

DNA A-Tailing Kit
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格(元) 说明书 数量
Takara 6109 DNA A-Tailing Kit 20 Rxns ¥320
 
■ 制品内容 (20 次量)
A-Tailing Enzyme (5 U/μl) 10 μl
10×A-Tailing Buffer 100 μl
dNTP Mixture (each 2.5 mM) 80 μl
A-Tailing Control Insert* (50 ng/μl) 10 μl
Blunting Control Insert* (50 ng/μl) 50 μl
 
* A-Tailing Control Insert 和Blunting Control Insert各为5次使用量。
 
■ 制品说明
TaKaRa DNA A-Tailing Kit 是在平滑末端DNA片段的3’末端添加一个“A”尾的试剂盒,使用本制品可以使平滑末端的DNA片段进行TA克隆成为可能。与平滑末端的DNA片段克隆相比,TA克隆具有较高的克隆效率,可以大大提高实验的成功率。此外,本试剂盒中还含有A-Tailing Control Insert (500 bp) 和Blunting Control Insert (500 bp),可以方便进行Control实验。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 用途
在平滑末端DNA片段的3’末端添加“A”尾后进行TA克隆。
 
■ 注意事项
1. 为了提高加“A”反应效率,用于加“A”反应的末端平滑DNA片段应进行切胶回收的纯化处理,尽量避免引物等其它杂质的存在。切胶回收时可使用Takara凝胶回收试剂盒 (Code No.: 9762)。
2. 使用A-Tailing Control Insert进行TA克隆时,可以检测使用的T载体是否质量可靠;使用Blunting Control Insert进行TA克隆实验时,可以检测本试剂盒的加“A”反应性能。
3. 按照本实验操作进行连接后,直接进行转化时的连接液不要超过20 μl。当要转化的DNA量较大或准备进行电转化时,需对连接液进行乙醇沉淀,纯化DNA后再进行转化。进行乙醇沉淀时使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。
4. 使用高效连接液Solution I 进行连接反应时请在25℃以下进行,温度升高 (>26℃) 较难形成环状DNA。连接效率偏低时,可适当延长连接反应时间至数小时。
 
 

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