本制品是采用5’-核酸酶法的探针检测专用Real Time PCR(qPCR)试剂。通过对添加了抗体的Hot Start PCR酶和Real Time PCR用Buffer分别进行了改良,可以在宽广的动态范围内实现高速、高特异性扩增。此外,对多个目的基因同时检出的反应 (multiplex) ,实现高灵敏度、高定量性,具有很好的再现性。
本制品是一种2X浓度的Premix型试剂,试剂中已添加了Tli RNaseH(耐热性RNaseH)和Uracil-N-Glycosylase (UNG),以cDNA为模板进行 PCR 反应时,Tli RNaseH可以很好抑制由于cDNA
中残存mRNA对 PCR 反应造成的阻害作用。另外,通过进行UNG反应,可降解之前使用该Kit扩增得到的PCR产物,能够有效避免交叉污染造成的假阳性结果
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■ 保存 |
-20℃
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■ 特长 |
1. 探针检测用2×Premix qPCR试剂。
2. 通过Hot Start PCR酶和改良的PCR缓冲液进行快速反应。
3. 支持多个目的片段同时检测反应。
4. Tli RNaseH和UNG可抑制PCR反应产生的假阳性。 |
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■ 操作注意 |
1. 使用前,请上下颠倒轻轻混合,避免起泡,混匀后再使用。如果试剂没有混匀,其反应性能会有所下降。不能使用振荡器混匀。
Probe qPCR Mix MultiPlus(2×conc.)在保存过程中有时会形成沉淀。此时,轻轻用手握一会儿或室温短时间放置后,颠倒混匀可以完全溶解。请确保试剂混合均匀后再使用。
2. 融解后的试剂请立即冰上放置。
3. 本制品中不包含探针,请另行准备。
4. 反应液的配制、分装请一定使用新的一次性枪头,尽量避免样品间的污染。
5. 如果样品和引物因混入核酸酶而被降解,则不能准确进行检测。实验者的汗液和唾液也会带入核酸酶,操作时应注意佩戴一次性手套和口罩。
6. 建议从反应液的配制到模板DNA的添加,设定以下3个实验区域,并进行物理性隔离。
区域1:反应液的配制及分装。
区域2:制备模板DNA。
区域3:将模板DNA添加到反应液中。
本制品无需电泳等分析反应结束后的扩增产物。为了避免污染,严禁从Tube管中取出扩增产物。
7. 各Real Time PCR扩增仪的分析方法请参见各仪器的使用说明书。如果分析软件中的校正功能不正确,则可能会导致结果判定错误。此时可参照Real Time PCR扩增说明书进行手动设定。 |
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