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  Takara Real Time PCR用
  引物探针设计合成服务
引物探针设计合成服务
引物探针设计合成验证一条龙服务
电  话:0411-87509077
E-mail:Service10@takara.com.cn
 
  本公司对Sample的情况及结果保证严守秘密
   
本公司承接所有序列公开生物种的Real Time PCR检测用引物探针设计合成服务,针对的Real Time PCR检测方法主要包括嵌合荧光法、双标记荧光探针法和Cycling探针法等。服务方式分为两种:引物探针设计合成服务和引物探针设计合成验证一条龙服务,客户可以根据需求自行选择。
   服务说明
 
本服务包含引物探针的设计、合成及实验验证的全套过程。利用此服务,不仅可以获得经过实验验证的确保实验成功率的高性能引物探针,还可以通过我们提供的引物探针验证报告获得优化的扩增条件,以及合适的试剂组合等信息。这样,既避免了前期摸索实验条件过程中大量的试剂消耗,更节省了大量的宝贵时间,帮助您更加轻松顺利地完成研究项目!
■ 服务流程
客户填写“Real Time PCR 引物探针设计合成验证一条龙服务委托书”→ 委托书接收 → 引物或引物探针设计 → 引物或引物探针合成→ 引物或引物探针验证* → 引物或引物探针以及验证报告寄送
* 若客户委托设计的对象物种是Human、Mouse、Rat、Cow、Dog、Chicken、Arabidopsis、Oryza 以外的其它物种,或所研究的目的基因只有在特定组织、特殊处理等条件下才有表达时,请提供足够量的高纯度核酸模板(浓度大于100 ng/μl;总量不少于3 μg),以供验证。
 
■ 制品内容
【Primer或Primer&Probe】
● 嵌合荧光法:1.5 ml tube管2支 (Forward Primer,Reverse Primer) 。
   双标记荧光探针法:1.5 ml tube管3支 (Forward Primer,Reverse Primer,Probe)。
   Cycling探针法:1.5 ml tube管3支或4支 (Forward Primer,Reverse Primer,1支或2支Probe)。
● 贮存溶液:TE (10 mM Tris-HCl/0.1 mM EDTA,pH8.0)
● 浓度:10 μM (Primer);3 μM~(Probe)
● 包装量:各400 μl (约25 μl 反应×400次)
【提供信息】
出具完整的验证报告,信息涵盖:
● 目的基因信息:生物种、Genbank Acc.或Gene ID或基因名称。
● 引物及探针信息:序列、GC含量、Tm值、Target在目的基因上的位置及扩增片段大小等。
● 验证数据:反应条件、扩增曲线、嵌合荧光法的融解曲线等。
● 验证实验使用的试剂信息。
3) 价格·交货期
检测方法 制品内容 价 格 交货期
嵌合荧光法 2支Primer 600 元 5 个工作日
双标记荧光探针法 2支Primer,1支Probe 2,000 元 10 个工作日
Cycling探针法 2支Primer,1支Probe 2,000 元 15 个工作日
2支Primer,2支Probe (针对SNP位点) 3,000 元 15 个工作日
注:选用探针法时,如果标记荧光物质较特殊 (如Cy3、Cy5等),服务费用会略有调整,具体请垂询。
 
    服务特长
 
● 适合Takara Real Time PCR系列产品使用,省略研究者繁琐的引物设计和反应条件优化操作。
● 针对嵌合荧光法,不易形成引物二聚体。
● 通常引物设计在不同的exon上,使genomic DNA的扩增难以进行*1
● 引物序列内不含有已知的SNP位点 (已在dbSNP上登录)*2
● 通过同源性检索确认了其特异性。
● 可根据实验目的,自主选择设计的区域。
① 根据目的基因的全序列设计。
② 在3' 端开始的1,500 Base内设计(用Oligo dT Primer进行反转录时使用)。
● 可通过设计不同报告基团标记的荧光探针实现在同一反应体系中的多基因多通道的同时检出*3
● 使用Cycling探针法适合SNP分型解析*4
以上设计条件尽量同时满足,不能同时满足时,本公司将按各种条件的优先顺序进行选择。
*1 如果所研究的目的基因上没有exon junction,或者即使有exon junction,在exon junction上设计的引物不适合模板扩增,此时引物也不在exon junction上设计。
*2 dbSNP是NCBI提供的单碱基置换突变、短序列插入突变、短序列缺失突变的Data Base (http://www.ncbi.nlm.gov/SNP/)。
*3 Takara公司生产的荧光探针有很多种,常用的探针见下表。
探针种类 淬灭基团 淬灭基团性质 建议使用的报告基团
双标记荧光探针
TAMRA 荧光物质 FAM,HEX,TET,JOE 等
BHQ 1
BHQ 2

BHQ 3
非荧光物质 FAM,HEX,TET,JOE,ROX,Cy5等
以上设计条件尽量同时满足,不能同时满足时,本公司将按各种条件的优先顺序进行选择。
此外,我们还可根据客户的特殊需要,生产特殊种类的双标记探针。详情请来电垂询。
*4 Cycling探针法是由RNA和DNA构成的杂合探针与RNase H组合使用的高灵敏度检测方法,是即使存在一个碱基不同也能识别的高特异性检出方法,特别适用于SNP分型解析。
 
    服务要求
 
请认真填写“Takara Real Time PCR用引物设计服务委托书”或“引物探针设计合成验证一条龙服务委托书”,按要求填写后通过传真或E-mail发送给我们或当地代理商。
委托书上需要提供的相关信息主要有:
① 检测方法 (嵌合荧光法、双标记荧光探针法、Cycling探针法)
② 服务种类 (引物探针设计合成服务、引物探针设计合成验证一条龙服务)
③ 生物种 (Human、Mouse、Rat、Cow、Dog、Chicken、Arabidopsis、Oryza等)
④ 目的基因信息 (Genbank Acc、Gene ID、关键词)