5×PrimeScript Buffer (NV)*2、*3 |
200 μl |
PrimeScript RT Enzyme Mix (NV)*2、*4 |
50 μl |
Random 6 mers (100 μM)*2 |
50 μl |
Premix Ex Taq (NV) (2×conc.)*5 |
625 μl × 2 |
GⅠPrimer Mix*6 |
50 μl |
GⅡ Primer Mix*6 |
50 μl |
GⅠProbe Mix*7 |
50 μl |
GⅡ Probe Mix*7 |
50 μl |
ROX Reference Dye (50×conc.)*8 |
50 μl |
ROX Reference Dye II (50×conc.)*8 |
50 μl |
RNase Free dH2O |
1 ml |
GⅠPositive Control DNA*9(4×106 Copies/μl) |
20 μl |
GⅡ Positive Control DNA*9(4×106 Copies/μl) |
20 μl |
EASY Dilution (for Real Time PCR)*10 |
700 μl |
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*1 本制品以8个浓度梯度 (n=3) 的标准曲线,检测样品、阳性对照 (n=2) 进行检测时,可对12个检测样品进行检测。
*2 反转录反应用试剂。
*3
含有dNTP Mixture及Mg2+。
*4 含有RNase Inhibitor。
*5
含有TaKaRa Ex Taq HS, dNTP Mixture, and Mg2+。
*6 碱基序列采用公定法中记载的碱基序列。
*7 含有荧光标记探针,应避光保存。
*8 用于Thermo Fisher Scientific的Real Time PCR扩增仪,用以校正孔与孔之间的荧光信号误差。
◆ 使用ROX Reference Dye的PCR仪
·Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
◆ 使用ROX Reference Dye II的PCR仪
·Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific)
◆ 不使用ROX Reference Dye或ROX Reference Dye II的PCR仪
·Thermal Cycler Dice Real Time System II(Code No. TP900/TP960:终卖)
*9 用于制作标准曲线的标准品。阳性对照是质粒DNA,不需要进行反转录反应。使用方法可与公定法中GI、GII阳性质粒DNA的使用方法相同。
注意:反复冻融会影响PCR反应的定量。
*10 Positive Control DNA梯度稀释时使用的稀释液。
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