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Takara Bio推出首款商用可溶性微流体慢病毒转导增强剂
 
Takara Bio USA, Inc.,Takara Bio Inc.全资子公司宣布推出Lenti-X Transduction Sponge(Code No. 631478),这是一款新上市的可溶性微流体转导增强剂,是对体外慢病毒介导的基因导入技术的一种创新。Lenti-X Transduction Sponge的工作流程简单易用,可在广泛细胞类型中实现高转导效率,助力基因和细胞治疗领域的下游研究应用。

Takara Bio USA总裁兼CEO Carol Lou表示:“Lenti-X Transduction Sponge将以其简单且优雅的设计改变病毒转导现在的格局。现有的技术依赖于时间和劳动密集型的过程,使用化学增强剂还可能会导致不确定的结果出现。这种新型的可靠、无毒的方法,为研究人员处理难转导的细胞,提供了一种能够节省时间和降低成本的新方法。”

这款转导海绵由Takara Bio USA与Yevgeny Brudno博士(北卡罗来纳大学和北卡罗来纳州立大学药学院和生物医学工程系副教授)合作开发。“我们很高兴看到Lenti-X Transduction Sponge,基于我在北卡罗来纳州立大学的实验室研发的支架技术所开发,现在将向世界各地的研究人员提供支持。”Dr. Brudno说,“很高兴能与Takara Bio合作改进细胞基因操作。转导海绵对重要的细胞疗法的生产可能会产生一些潜在影响,我们对此感到非常兴奋。”

当前方法上的一些限制,使得慢病毒转导这个过程非常繁琐。例如,spinoculation(使用离心机拉近慢病毒和细胞的距离)和化学增强剂是提高转导效率的常用技术。然而,这些方法要么需要耗费大量的时间,要么受限于特定细胞类型,并且这些方法通常是需要优化的。微流体系统,通过在空间上将细胞和病毒限制在较小的区域来促进细胞与病毒的接触,到目前为止,这种技术需要特定的芯片和硬件来驱动微流体通道的流动。
 
Lenti-X Transduction Sponge可安全地取代并解决spinoculation、化学增强剂和微流体设备固有存在的一些问题。这种转导海绵由具有高生物相容性的钙离子交联海藻酸盐制成,通过在大孔3D结构共定位靶细胞和病毒来提高转导效率。转导后,通过使用所提供的特定缓冲液溶解海绵,细胞会被温和地释放出来,释放出的细胞保持高细胞活力和很好的细胞表型。简便易用的工作流程能够最大限度地提高众多靶标细胞的转导效率,包括人原代T细胞、CD34+造血干细胞、自然杀伤细胞、悬浮和贴壁细胞系。图A展示了每个试剂盒包含24个独立海绵,每个海绵能够促进多达1x106个细胞的转导;图B所示图像是150倍放大的海绵微流体孔隙结构,孔径范围在20-300 μm之间。
 
Lenti-X Transduction Sponge在多种细胞类型中促成与spinoculation相当的转导水平。图A. 使用ZsGreen1慢病毒以图中标明的感染复数(MOIs)转导1×106个Jurkat细胞,分别通过spinoculation和Lenti-X Transduction Sponge进行转导。Spinoculation培养物在8 μg/ml polybrene存在情况下,以1400xg 32℃离心90 min。转导48小时后通过FACS分析ZsGreen1的表达确认转导效率。图B. 为了进一步比较海绵转导与Spinoculation (图中的“Spin”),使用ZsGreen1慢病毒以不同MOIs转导了多种细胞类型,操作与图A所述相同。从这两组实验结果可以看出,在Jurkat、THP-1、U937、K562、EL4、Raji、11PO-1这些细胞类型上,Lenti-X Transduction Sponge的转导效果与spinoculation相当或者略高。
 
Lenti-X Transduction Sponge有效提高原代T细胞转导效率,同时保持良好的细胞活力。图A. 使用MHC四聚体、抗CD3/CD28包被磁珠、Retronectin试剂(RN)+CD3或者仅CD3活化人原代T细胞。上图显示了CD69+表达百分比指示的48小时的活化水平。然后,使用转导海绵以特定感染复数(MOI)转导ZsGreen1慢病毒至1×106个活化细胞,转导24小时。在转导后48小时进行FACS分析确定%ZsGreen1。图B. 通过7-AAD染色和FACS分析测定转导后48小时的细胞存活率。从这两组实验结果可以看出,使用Lenti-X Transduction Sponge转导后,T细胞转导效率最高接近于80%,同时活细胞占比约90%。
 
Lenti-X Transduction Sponge是一种创新的基于可溶性微流体技术的慢病毒转导增强剂,不仅用户友好度高,而且可与多种细胞类型兼容,像CD34-HSC、NK细胞、T细胞这些类型也是没有问题的。很重要的一点,这项技术在简便易用、更大程度上减少了对细胞的处理和手动操作时间的基础上,可以达到与传统方法相当或优于传统方法的转导效率。有了这款利器的加持,相信会让您的项目研究如虎添翼、虎虎生威。
 
Takara Bio作为重要的生物技术企业,在病毒基因导入系统方面体系完备,拥有慢病毒系统、逆转录病毒系统、腺相关病毒系统、腺病毒全套解决方案,为相关生物学基础研究提供强力支持,为寄予厚望的细胞与基因治疗研究护航加码。
 
 

页面更新:2024-07-01 10:31:32