我们使用cookie改善您的浏览体验并提供有意义的内容。请阅读我们的cookie协议
收藏我们 在线订购 CoA查询
     

机构用户解决方案

产品选择指南

技术服务信息

当前位置:首页 > 新闻中心
无标题文档
低价格高品质的TaKaRa Taq HS真实数据大公开!
 

价格,已不再是个问题。毕竟,您的选择,才是对我们的肯定,也是我们继续努力的动力。
质量,从来不是个问题。坚持与毫不妥协,是我们对产品质量标准的一贯追求,永远目标。
应用,是为了解决问题。从甲流到非洲猪瘟,再到新冠, 您的无悔选择已经说明了问题。

 
众多厂家选择TaKaRa Taq™ HS作为检测试剂的原料,是对其质量一致性、批间稳定性和良好性价比的肯定。看了下面的资料,相信您会对TaKaRa Taq HS的制品质量和稳定性有新的认识。
如果您有兴趣试用该产品,请随时和我们联系。如果您有意长期、批量购买该产品,我们欢迎并恭候您的垂询。
联系邮箱:bulkorder@takarabiomed.com.cn
 
有外审需求的客户,请通过代理商与我们联系。
 
———— Takara真实数据大曝光 ————
 
1. RI法测定酶活——准确性高
Takara公司的酶活测定方法:放射化学测定法(Radioactive Isotope,RI)
TaKaRa Taq HS活性定义:用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为 1 个活性单位(U);
TaKaRa Taq HS酶活测定方法:RI法,通过测定H3标记dTTP的摄入量计算活性。该方法准确性高,特异性强。
产品标签5 U/μl的Taq HS实测活性
TaKaRa Taq HS 4.97
A公司 5.24
B公司 3.00
C公司 1.58
D公司 7.95
E公司 4.04
F公司 2.82
G公司 4.42
H公司 5.91
J公司 2.08
K公司 3.83
· 其他公司酶活测定方法:荧光修饰法、功能测定法等,都需要使用标准对照品,属于相对活性测定,准确度低。
· 表中数据显示,不同公司的Taq HS,标签均为5 U/μl,但实测浓度偏高或偏低,每批产品的酶活性变化会很大。
 
TaKaRa Taq HS的酶活,采用权威的放射性活性测定法,准确性更高,从源头上保证了产品活性的真实性、稳定性、一致性
 
2. 不同Lot批间差非常小——全过程的质量管理体系,稳定性高
 
1)抗体封闭效率差异
结果说明
· 每Lot的封闭效率均在97%以上,说明抗体对TaKaRa Taq™ HS的封闭效果很好,可以有效减少非特异性扩增。
· 通常分子体外诊断Kit的CV要求是5%以内。TaKaRa Taq™ HS封闭效率的CV仅为0.53%,说明批间差非常小,稳定性高,可靠性高,更大程度降低了IVD Kit的研发、质控难度。
 
不同批次的TaKaRa Taq™ HS,差异非常小,稳定性非常高。
 
2)End Point PCR产物差异
 
结果说明
· 使用TaKaRa Taq HS扩增8 kb产物 ,10 Lot电泳结果基本相当;PicoGreen定量PCR产物,Lot间CV值仅为3.05%,说明Lot差非常小。
· 电泳结果及PicoGreen定量结果均显示TaKaRa Taq HS 优于A公司产品。
 
3)qPCR结果差异
 
结果说明:进行qPCR时,
· 不同浓度梯度下,TaKaRa Taq HS 10 Lot间Ct值的变异系数CV非常小,0.3%-0.9%之间 ,说明Lot差非常小,更大程度保证了IVD产品的CV值要求,为诊断企业研发、生产稳定的IVD产品提供了保障。
· TaKaRa Taq HS 的Ct值明显小于A公司产品,性能更优。
 
3. 抗体对酶的封闭效率高——有效降低非特异性扩增
1)Hot Start PCR的原理
Hot Start PCR法是提高PCR特异性的重要方法之一。
 
master mix的配置阶段,PCR第一个循环前的升温阶段,容易产生引物二聚体 or 引物模板的错配。使用抗体修饰的PCR酶可以有效降低非特异扩增。
· 如果PCR酶没有和抗体结合,PCR酶的聚合酶活性会导致错配被扩增,也就是非特异性扩增,并且这个错误的PCR产物在后续PCR循环中会被不断放大
· 如果PCR酶和抗体结合,PCR循环前,抗体抑制了聚合酶的活性,该阶段的错配不会被扩增。后续PCR循环时,抗体变性,聚合酶活性恢复,错配被打开,就不会产生大量错误的PCR产物。从而降低了非特异性扩增,提高目的DNA片段的扩增效率,降低了假阳性出现的概率
 
2)抗体对Taq酶的封闭效果
公司&产品 抗体变性后
Taq恢复活性(U/μl)
抗体对Taq酶的
封闭效率
TaKaRa Taq HS 4.97 99.53%
A公司 5.24 97.09%
B公司 3.00 94.44%
C公司 1.58 91.68%
D公司 7.95 97.04%
E公司 4.04 97.15%
F公司 2.82 97.79%
G公司 4.42 99.40%
H公司 5.91 87.21%
J公司 2.08 59.36%
K公司 3.83 99.88%
 
结果说明:进行qPCR时,
· 各品牌酶浓度均表示为5 U/μl,但实测浓度相差很大。
· TaKaRa Taq HS,酶的活性定量准确,抗体封闭效率优良。
· B公司、C公司的封闭效率偏低,H公司、J公司的封闭效率非常低→产生非特异性扩增的可能性更高,影响目的产物的扩增。
· 部分公司酶的实测活性偏低或过高,说明酶活测定结果不准确,批间差大。
 
4. Hot Start PCR效果明显——作为IVD原料时更易操作,灵活性高
1)Taq HS的Hot Start效果验证—评价方法
 
2)Taq HS的Hot Start效果验证—结果展示
· R001的全部结果都存在非特异性扩增,说明使用非HS型Taq酶时,非特异性扩增产生概率高于HS型PCR酶
· R007第1泳道的非特异性条带,在第2泳道时没有出现,说明R007的抗体,可以有效降低非特异性扩增
· R007第4泳道,没有出现非特异性扩增,说明master mix室温放置24 hr,抗体依然保持了HS作用,操作较慢或样本较多时,抗体依然保持了活性,对于IVD Kit研发,这是非常重要的优势
 
本文实验数据来自于Takara Biomedical Tech. Co., Ltd.
 
点击图片,了解更多信息
 
 
 

页面更新:2024-06-06 09:32:18