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Takara Taq酶家族再添新成员!

 

PCR及qPCR技术的核心是利用DNA polymerase对DNA模板进行反复扩增,从而实现对微量的DNA样本进行后续检测和分析。PCR技术不仅仅可用于基础研究,还适用于临床诊断、法医学调查等实际应用。这些应用要求更稳定的性能、卓越的灵敏度和严格的控制标准。因此,所使用的核心原料DNA polymerase必须符合这些要求。
Takara Bio于1988年在日本获得了使用PCR技术的基因扩增系统的独家经销权,1993年在全球范围内获得PCR相关专利许可,开始自行生产PCR产品。2004年率先在中国市场销售qPCR产品,为中国万千科研人员提供了高质量、稳定的PCR及qPCR产品及技术。
 
在此基础上,Takara Bio从未停止前进的脚步,一直根据客户的需求不断研发新品。
 
 
下表是Takara 经典Taq酶及其众多的衍生PCR 酶成员,组建的Takara Taq酶家族涵盖了临床检测及诊断等多种应用场景。
Code No. 产品名称 特点
R001A TaKaRa Taq 基础PCR酶,可广泛用于PCR及qPCR。
R007A TaKaRa Taq™ Hot Start Version
RR001A TaKaRa Ex Taq® 高扩增效率、高灵敏度、高扩增量。推荐用于qPCR。
RR006A TaKaRa Ex Taq® Hot Start Version
RR02MA TaKaRa LA Taq® 长链扩增。推荐用于PCR。
RR042A TaKaRa LA Taq® Hot Start Version
RR02AG TaKaRa Ex Taq® with GC Buffer
TCH014
(新品)
Mighty Taq HS DNA Polymerase (High Sensitivity) 抗阻害性强、适用于各种复杂模板及粗提样本。
R090A TaKaRa Taq™ HS Low DNA 更低背景的PCR酶
639210 Titanium® Taq DNA Polymerase 缺乏野生型Taq的5→3核酸外切酶活性,灵敏度高,推荐用于PCR
更多产品请浏览Takara中国网站:https://www.takarabiomed.com.cn/
 
  TaKaRa Taq酶优势
1. 真实可靠的活性定义
Taq酶具有灵敏度高、扩增性能强的特点,如果活性定义不准确或者存在批间差,会导致使用中出现较大的问题。TaKaRa Taq酶活性测定利用同位素法,具有更高的准确性,是真实的活性定义,可以精准地控制各个批次之间的活性差异,免除了因不同批次Taq酶酶活不同而导致扩增灵敏度差异带来的烦恼。 除了真实且精准的活性测定之外,TaKaRa Taq酶也有功能性验证数据,以确保其在PCR应用中的性能。有了这两项检测的双重保障,就可以大大减少客户使用TaKaRa Taq酶在实际应用中遇到的问题。
 
2. 别具一格(严格)的污染控制
TaKaRa Taq酶在污染控制方面,除了有常见的核酸酶污染检测之外,还有别具一格的E.coli基因组DNA的污染检测,因为目前市售的Taq DNA Polymerase几乎均是经过克隆转化到E.coli中进行表达后,分离提取得到的,那么就可能存在E.coli基因组DNA导致的内源性污染,这种污染会明显影响微生物群相关研究的结果,有了这一检测就能够进一步提高酶的纯度以及相关检测的准确度。
下方实验例通过巢式PCR检测了TaKaRa Taq酶和其他公司的Taq DNA Polymerase(标准级别)的E.coli基因组DNA污染。
图1:E. coli基因组的Ori区域和引物设计
(Takara Bio Inc.比较结果)
从图2结果来看,TaKaRa Taq中没有E.coli基因组DNA的扩增片段,但其他公司的Taq DNA Polymerase(标准级别)有ori区域(143 bp)的扩增片段。证明TaKaRa Taq酶中的E.coli基因组DNA量很少,在巢式PCR扩增检测界限1-10 fg以下,品质高于其他公司标准级别的Taq DNA Polymerase。
 
3. 锦上添花的Takara hot start技术
Hot Start技术是提高PCR特异性的重要方法之一,在反应液温度达到高温前,抗体一直抑制聚合酶的活性,可有效抑制PCR循环前因引物的错配或引物二聚体的形成而导致的非特异性扩增,从而可以提高目的DNA片段的扩增效率,提高PCR反应的重现性,且无需追加特殊的反应步骤。目前Takara大多数的PCR酶都有Hot Start Version,在同样的循环条件下,可以放心使用Hot Start Version替换以前的酶,基本性能一样。
 
  TaKaRa Taq酶家族成员重点推荐
新品上市!Mighty Taq——抗阻害热启动Taq DNA聚合酶(高灵敏度)
产品特点:
1.抗阻害效果好:对化学物质耐阻害性强;可对应多种粗提样品的扩增,如血液、抗凝血、动物组织、植物组织、土壤等。
2.灵敏度高:可满足低拷贝模板检测要求,搭配优化的buffer,特异性和灵敏度更高。
3.快速扩增:支持快速反应程序,最短可在30 min内(仪器快速模式)进行Real Time PCR分析,提高检测效率。
4.兼容性广:对于模板类型、模板GC含量和引物Tm值等具有广泛的兼容性,且适合于End Point PCR和qPCR多种检测场景。
5.操作灵活:本品包含酶和buffer两种组分,可以根据样本的阻害程度,灵活调整酶量以达到更好的扩增效果。
 
1)抗阻害性评价-化学阻害物:
· 针对化学阻害物质,选择具有代表性的腐殖酸、高铁血红素、SDS作为杂质背景。
· 使用对照品TaKaRa Taq Hot Start Version (R007A)和TCH014,对HL60 cDNA 进行hACTB基因扩增。
· 结果可见,与R007A相比,TCH014具有强大的杂质耐受能力,可应对含化学阻害物的样本的扩增。
 
2)抗阻害性评价-血液:EDTA/柠檬酸钠/肝素钠抗凝猪血
· 针对血液样本的扩增,选择杂质背景较高的3种抗凝猪血(EDTA/柠檬酸钠/肝素钠)。
· 使用对照品TaKaRa Taq Hot Start Version (R007A)和TCH014,对血液进行COX I基因扩增。(参照RR912体系)
· 结果显示,与R007A相比,TCH014具有强大的杂质耐受能力,可应对血液样本的扩增。
 
3)抗阻害性评价-动物组织:
· 针对动物组织的扩增,选择牛肌肉组织、猪肉组织的裂解粗品。
· 使用对照品TaKaRa Taq Hot Start Version (R007A)和TCH014进行扩增。(牛肉、猪肉扩增COX I基因,参照RR910/RR912体系)
· 结果可见,与同类品Taq HS相比,TCH014具有强大的杂质耐受能力,可应对动物组织裂解粗品的扩增。
 
  Takara低背景Taq Low DNA
由于PCR扩增时的污染可能来源于PCR酶、dNTP、Primer等多个环节,所以对于诊断公司而言,想要构建一套完全没有污染的检测体系,需要考虑到上述各个环节引入污染的可能。
Takara目前可以根据客户需求,定制出Low DNA的PCR检测体系,包含酶、dNTP、Primer等PCR所必备的试剂,经过特殊处理,保证其中基本不含任何来源的DNA污染,从而满足诊断客户对高灵敏度、高检出率并避免假阳性的特殊要求。
上文提到,Takara Taq酶在污染控制方面,有别具一格的E.coli基因组DNA的污染检测,但如果是在微量检测样品的菌群解析及单细胞的PCR扩增等需要高准确度解析的实验体系,出现背景会对结果分析产生很大影响,这时就需要使用对E.coli基因组DNA污染控制更加严格的Takara低背景Taq Low DNA系列产品。
随着PCR 酶反应性能的提高,宿主大肠杆菌来源DNA 及环境来源DNA 对PCR 酶非常微弱的污染可导致假阳性及无模板(No Template Control)的扩增。特别是在微量检测样品的菌群解析及单细胞的PCR 扩增等需要高准确度解析的实验体系,如果出现背景会对结果分析产生很大的影响。
为了满足「高纯度、高灵敏度的PCR酶」这一需求开发了Low DNA系列产品。
Takara Bio向中国用户持续稳定供给以PCR及qPCR技术为核心的上下游产品,产品主要包括PCR/qPCR、基因克隆、基因功能研究、蛋白质功能研究、二代测序、干细胞研究等产品及服务,并可提供客户定制化服务。还开展以细胞治疗为中心的生物工程领域的技术开发与服务,销售细胞治疗和基因治疗相关产品。
 
更多需求,请发送邮件至:bulkorder@takarabiomed.com.cn
 
本文的关联产品:
Code No. 产品名称 特点
TCH004 PrimeScript™ III Reverse Transcriptase 耐热型反转录酶(~55℃)
适用于RT-LAMP
2641A Reverse Transcriptase M-MLV (RNase H-) 基础反转录酶
2680A PrimeScript™ Reverse Transcriptase 高性能反转录酶
2313A Recombinant RNase Inhibitor 重组型RNA酶抑制剂
4030 dNTP Mixture DNA聚合酶底物
RR380A BcaBEST® DNA Polymerase ver.2.0 LAMP等温扩增聚合酶
R510A TaKaRa Tth 多功能PCR酶(一酶两用)
2820 Uracil DNA Glycosylase (UNG),heat-labile 消化含有dU的单链或双链DNA
TCH002 Lyo-Ready qPCR Master Mix 可冻干的探针法qPCR试剂(含冻干保护剂)
TCH003 Lyo-Ready One Step RT-qPCR Master Mix 可冻干的探针法1步法RT-qPCR专用试剂(含冻干保护剂)
 
 

页面更新:2024-04-29 11:35:03