Takara Taq酶家族再添新成员! |
||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||
PCR及qPCR技术的核心是利用DNA polymerase对DNA模板进行反复扩增,从而实现对微量的DNA样本进行后续检测和分析。PCR技术不仅仅可用于基础研究,还适用于临床诊断、法医学调查等实际应用。这些应用要求更稳定的性能、卓越的灵敏度和严格的控制标准。因此,所使用的核心原料DNA polymerase必须符合这些要求。 Takara Bio于1988年在日本获得了使用PCR技术的基因扩增系统的独家经销权,1993年在全球范围内获得PCR相关专利许可,开始自行生产PCR产品。2004年率先在中国市场销售qPCR产品,为中国万千科研人员提供了高质量、稳定的PCR及qPCR产品及技术。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||
在此基础上,Takara Bio从未停止前进的脚步,一直根据客户的需求不断研发新品。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
下表是Takara 经典Taq酶及其众多的衍生PCR 酶成员,组建的Takara Taq酶家族涵盖了临床检测及诊断等多种应用场景。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||
更多产品请浏览Takara中国网站:https://www.takarabiomed.com.cn/ | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
TaKaRa Taq酶优势 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
1. 真实可靠的活性定义 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
Taq酶具有灵敏度高、扩增性能强的特点,如果活性定义不准确或者存在批间差,会导致使用中出现较大的问题。TaKaRa Taq酶活性测定利用同位素法,具有更高的准确性,是真实的活性定义,可以精准地控制各个批次之间的活性差异,免除了因不同批次Taq酶酶活不同而导致扩增灵敏度差异带来的烦恼。 除了真实且精准的活性测定之外,TaKaRa Taq酶也有功能性验证数据,以确保其在PCR应用中的性能。有了这两项检测的双重保障,就可以大大减少客户使用TaKaRa Taq酶在实际应用中遇到的问题。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
2. 别具一格(严格)的污染控制 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
TaKaRa Taq酶在污染控制方面,除了有常见的核酸酶污染检测之外,还有别具一格的E.coli基因组DNA的污染检测,因为目前市售的Taq DNA Polymerase几乎均是经过克隆转化到E.coli中进行表达后,分离提取得到的,那么就可能存在E.coli基因组DNA导致的内源性污染,这种污染会明显影响微生物群相关研究的结果,有了这一检测就能够进一步提高酶的纯度以及相关检测的准确度。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
下方实验例通过巢式PCR检测了TaKaRa Taq酶和其他公司的Taq DNA Polymerase(标准级别)的E.coli基因组DNA污染。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
图1:E. coli基因组的Ori区域和引物设计 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
(Takara Bio Inc.比较结果) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
从图2结果来看,TaKaRa Taq中没有E.coli基因组DNA的扩增片段,但其他公司的Taq DNA Polymerase(标准级别)有ori区域(143 bp)的扩增片段。证明TaKaRa Taq酶中的E.coli基因组DNA量很少,在巢式PCR扩增检测界限1-10 fg以下,品质高于其他公司标准级别的Taq DNA Polymerase。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
3. 锦上添花的Takara hot start技术 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
Hot Start技术是提高PCR特异性的重要方法之一,在反应液温度达到高温前,抗体一直抑制聚合酶的活性,可有效抑制PCR循环前因引物的错配或引物二聚体的形成而导致的非特异性扩增,从而可以提高目的DNA片段的扩增效率,提高PCR反应的重现性,且无需追加特殊的反应步骤。目前Takara大多数的PCR酶都有Hot Start Version,在同样的循环条件下,可以放心使用Hot Start Version替换以前的酶,基本性能一样。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
TaKaRa Taq酶家族成员重点推荐 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
新品上市!Mighty Taq——抗阻害热启动Taq DNA聚合酶(高灵敏度) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
产品特点: 1.抗阻害效果好:对化学物质耐阻害性强;可对应多种粗提样品的扩增,如血液、抗凝血、动物组织、植物组织、土壤等。 2.灵敏度高:可满足低拷贝模板检测要求,搭配优化的buffer,特异性和灵敏度更高。 3.快速扩增:支持快速反应程序,最短可在30 min内(仪器快速模式)进行Real Time PCR分析,提高检测效率。 4.兼容性广:对于模板类型、模板GC含量和引物Tm值等具有广泛的兼容性,且适合于End Point PCR和qPCR多种检测场景。 5.操作灵活:本品包含酶和buffer两种组分,可以根据样本的阻害程度,灵活调整酶量以达到更好的扩增效果。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||
1)抗阻害性评价-化学阻害物: | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
· 针对化学阻害物质,选择具有代表性的腐殖酸、高铁血红素、SDS作为杂质背景。 · 使用对照品TaKaRa Taq Hot Start Version (R007A)和TCH014,对HL60 cDNA 进行hACTB基因扩增。 · 结果可见,与R007A相比,TCH014具有强大的杂质耐受能力,可应对含化学阻害物的样本的扩增。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||
2)抗阻害性评价-血液:EDTA/柠檬酸钠/肝素钠抗凝猪血 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
· 针对血液样本的扩增,选择杂质背景较高的3种抗凝猪血(EDTA/柠檬酸钠/肝素钠)。 · 使用对照品TaKaRa Taq Hot Start Version (R007A)和TCH014,对血液进行COX I基因扩增。(参照RR912体系) · 结果显示,与R007A相比,TCH014具有强大的杂质耐受能力,可应对血液样本的扩增。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||
3)抗阻害性评价-动物组织: | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
· 针对动物组织的扩增,选择牛肌肉组织、猪肉组织的裂解粗品。 · 使用对照品TaKaRa Taq Hot Start Version (R007A)和TCH014进行扩增。(牛肉、猪肉扩增COX I基因,参照RR910/RR912体系) · 结果可见,与同类品Taq HS相比,TCH014具有强大的杂质耐受能力,可应对动物组织裂解粗品的扩增。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||
Takara低背景Taq Low DNA | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
由于PCR扩增时的污染可能来源于PCR酶、dNTP、Primer等多个环节,所以对于诊断公司而言,想要构建一套完全没有污染的检测体系,需要考虑到上述各个环节引入污染的可能。 Takara目前可以根据客户需求,定制出Low DNA的PCR检测体系,包含酶、dNTP、Primer等PCR所必备的试剂,经过特殊处理,保证其中基本不含任何来源的DNA污染,从而满足诊断客户对高灵敏度、高检出率并避免假阳性的特殊要求。 上文提到,Takara Taq酶在污染控制方面,有别具一格的E.coli基因组DNA的污染检测,但如果是在微量检测样品的菌群解析及单细胞的PCR扩增等需要高准确度解析的实验体系,出现背景会对结果分析产生很大影响,这时就需要使用对E.coli基因组DNA污染控制更加严格的Takara低背景Taq Low DNA系列产品。 随着PCR 酶反应性能的提高,宿主大肠杆菌来源DNA 及环境来源DNA 对PCR 酶非常微弱的污染可导致假阳性及无模板(No Template Control)的扩增。特别是在微量检测样品的菌群解析及单细胞的PCR 扩增等需要高准确度解析的实验体系,如果出现背景会对结果分析产生很大的影响。 为了满足「高纯度、高灵敏度的PCR酶」这一需求开发了Low DNA系列产品。 |
||||||||||||||||||||||||||||||||||
Takara Bio向中国用户持续稳定供给以PCR及qPCR技术为核心的上下游产品,产品主要包括PCR/qPCR、基因克隆、基因功能研究、蛋白质功能研究、二代测序、干细胞研究等产品及服务,并可提供客户定制化服务。还开展以细胞治疗为中心的生物工程领域的技术开发与服务,销售细胞治疗和基因治疗相关产品。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
更多需求,请发送邮件至:bulkorder@takarabiomed.com.cn | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
本文的关联产品: | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||
页面更新:2024-04-29 11:35:03