|
自从情人节企划活动开展以来，我们收到了很多有爱的小故事，首先在这里感谢大家的关注，也把最重要的提醒写在最前面，记得扫描每期文末二维码打卡！打卡十二期的约定可要记得呀～ 7月银色情人节是把意中人带回家给父母认识，邀请长辈一起见证甜蜜爱情的节日！你们一起回家见家长了吗？希望大家都能有走出第一步的勇气，和爱的人一起牵手回家！ 而Takara今天想把不一样的浪漫介绍给你～ 酵母双杂交技术是由Fields和Song在1989年提出的。该技术的产生是基于对酵母细胞的转录因子GAL4性质的研究。转录因子GAL4包括两个结构域，分别是位于N端的DNA结合域（DNA binding domain，DNA-BD）和位于C端的转录激活域（Activati on domain，AD)。DNA-BD能够识别并结合于GAL4效应基因（GAL4-responsivegene）的上游激活序列(Upstream activating sequence，UAS)。而AD则是通过与转录机制（transcription machinery）中的其他成分之间的结合作用，以启动UAS下游的基因进行转录。当DNA-BD和AD分开独立存在时，并不能激活转录反应，只有当二者在空间距离非常接近时，才会呈现完整的GAL4转录因子活性并可激活UAS下游启动子，使启动子下游基因得到转录。根据这个特性，将编码DNA-BD的基因与已知蛋白质的基因构建在同一个表达载体上，所获得的融合蛋白质叫做诱饵蛋白质（Bait）；将编码AD的基因和cDNA文库的基因构建在另一个表达载体上，所得到的融合蛋白质叫做猎物蛋白质（Prey）。Bait和Prey发生相互作用，形成完整的转录因子GAL4，使酵母菌基因组的效应基因表达。 当我们的酵母杂交实验进行到后期，菌落PCR是分析验证插入片段，并对阳性克隆进行分类的简便、快速的方法。 |
| 两个酵母杂交实验宝藏单品！了解一下Takara快速验证插入片段的小妙招！ |
| 可以验证整合到酵母单杂交实验中酵母基因组的Bait DNA序列。 在Matchmaker Gold酵母单杂交系统中，目标/bait DNA序列重复串联后克隆到pAbAi报告载体上。用同源重组的方法将携带Bait的载体整合到Y1HGold酵母基因组中，用于后续文库的筛选。在文库中，可能与Bait DNA序列相互作用的Prey蛋白的cDNA与GAL4 AD融合表达，文库通过SMART技术与同源重组技术直接构建于Y1HGold[Bait-AbAi]报告菌株中。当Prey蛋白与Bait序列结合时，相应的GAL4 AD会激活AbAr的表达，酵母可在添加了AbA的培养基上生长。在文库筛选中，编码prey蛋白的质粒可以较容易地从酵母克隆中分离出来进行后续的验证分析。 |
| 可以快速分析酵母单杂交实验及酵母双杂交实验中阳性克隆子的插入片段有无及大小。 Matchmaker Insert Check PCR Mix 2是2X预混液，可以简便快速地直接以酵母菌落为模板进行PCR扩增。该混合液可以用于Matchmaker Gold酵母单杂交和酵母双杂交筛选系统，可以快速地扩增、分选并分析文库筛选所获得的阳性克隆中Prey/文库质粒的cDNA插入片段。Matchmaker Insert Check PCR Mix 2包含PCR聚合酶、引物、dNTPs和缓冲液，仅仅需要将待验证的细胞添加到混合液中，然后进行PCR即可得到结果。 |
| “小妙招”+“实验必需筛选试剂”！本期活动贴心推出酵母杂交实验筛选验证套装！ 欢迎各位宝粉直接联系代理商按需订购！ |
 |
| 活动时间：2023/7/14-2023/8/14 |
| 活动参与方式：联系代理商下单即可订购。PS：不要忘了扫描下方二维码参与我们的情人节企划活动呀～ |
 |
| 活动期间按套装下单还可获得下单礼：Takara定制白大褂。 |
 |
| 关联产品推荐： |
| 将Bait DNA序列重复串联后克隆到报告载体上，系统文库通过SMART技术与同源重组技术直接构建于Y1HGold报告菌株中用于后续文库的筛选。 |
| 系统中所包含的新的Y2HGold酵母菌株、更加严密的筛选报告基因、简单易用的文库、高水平表达的载体以及基于SMART技术的文库构建试剂盒。 |
| 今天有认真准备了一个浪漫小彩蛋！快数一数今天文章里的汉字是不是有1314个？ 【我真的有在认（cou）真（zi）做（shu）这个非常非常非常非常非常非常浪漫的彩蛋！】 |
页面更新：2023-07-14 14:21:20
京公网安备 110114000405号