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Takara IVTpro™ mRNA合成系统喜提创新奖!
 
2023开门红!Takara产品不负众望,在“生物通2022十大创新产品”评选中榜上有名,这次迎来高光时刻的是我们的新产品——Takara IVTpro™ mRNA合成系统!不仅可以用于mRNA相关的基础研究,还可以用于mRNA疫苗、肿瘤免疫治疗等应用研究!
 
  上榜理由  
新冠疫情让mRNA疫苗成为全球关注的热点。在mRNA疫苗的研发过程中,体外转录(IVT)是重要的一环。Takara新推出的IVTpro™mRNA合成系统能够助力mRNA研发,快速建立mRNA合成技术路线。它包含了从DNA模板制备到mRNA合成实验所需的全套工具。In-Fusion无缝克隆技术可帮助您轻松构建模板质粒DNA。而在体外转录反应中,优化的T7 RNA聚合酶也使得RNA合成效率更高、产量更大!
 
【具体看看】Takara IVTpro™ mRNA合成系统组成
Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System(Code No. 6141)是一款能够简便、高效合成带有Cap结构和Poly(A)序列的mRNA体外转录试剂盒。它包含以下两种制品(可单独购买):
 
① Cloning Kit for mRNA Template(Code No. 6143):用于DNA模板构建
本试剂盒用于将模板DNA无缝克隆到预线性化载体(包含在本试剂盒中)中构建用于体外转录反应的模板质粒。预线性化载体中包含T7 启动子、转录起始序列 (AGG)、5'-UTR(非编码区)、3'-UTR、和105-base Poly(A) 序列。试剂盒还包含用于将目标DNA无缝克隆到预线性化载体的In-Fusion Snap Assembly Master Mix和FLuc对照片段(包括15 bp,3' In-Fusion sequence;FLuc CDS;和15 bp,5' In-Fusion sequence)。
 
② Takara IVTpro™ T7 mRNA Synthesis Kit(Code No. 6144):RNA合成试剂
本试剂盒以含有T7启动子序列的双链DNA为模板,使用优化的高效T7 RNA聚合酶,通过体外转录可合成大量mRNA。除此以外,还包含用于IVT反应后消化模板DNA的DNase I和用于纯化mRNA的氯化锂 (LiCl) 溶液。真核细胞翻译蛋白质需要RNA的5’端有Cap结构,配合使用CleanCap Reagent AG(TriLink公司的Cap类似物)可以高效制备具有Cap结构的mRNA。
※ Cap类似物不包含在本产品中,请另外准备CleanCap Reagent AG (TriLink公司)。
 
【不服不行】Takara IVTpro™ mRNA合成系统五大优势!
优势No.1:采用In-Fusion无缝克隆,轻松构建模板质粒DNA。
构建参加IVT反应的DNA模板质粒操作非常简单,只需设计好带有In-Fusion序列的目标基因(GOI),即可一步轻松完成模板质粒的构建!
*1:“Transcription start sequence(AGG)”是使用 CleanCap Reagent AG 有效制备带 Cap 结构的 mRNA 时所需的转录起始序列。
 
优势No.2:通过体外转录(IVT)反应合成带有Cap结构和Poly(A)序列的mRNA。
为什么要合成带有Cap结构的mRNA?
mRNA的5’端帽子结构(m7GpppN)发现于上世纪70年代,它的存在赋予了mRNA稳定性,并使其能够有效翻译。在真核细胞中,除了识别蛋白质合成的起始之外,5’端帽子结构还充当从5’到3’外切核酸酶切割的保护基团。也就是说5’Cap相当于一顶钢盔,保护mRNA不受免疫系统降解,因此Cap结构对于mRNA疫苗研发很重要。本试剂盒配合使用CleanCap Reagent AG(TriLink公司的Cap类似物)可以高效制备具有Cap结构的mRNA。
通过体外转录(IVT)反应合成的 mRNA产量:
此图分别为加入和不加入CleanCap Reagent AG (3'OMe)的情况下,IVT反应溶液中合成Firefly luciferase (萤火虫荧光素酶,FLuc) mRNA的产量。由此可见,Takara IVTpro™ mRNA合成系统兼容CleanCap试剂,使用CleanCap不影响mRNA产量。
 
优势No.3:优化的T7 RNA聚合酶用于IVT反应,RNA合成效率高、产量大。
使用本产品,每次反应(20 μl反应体系)可以合成高达 200 μg或更多的RNA。还可以根据需要放大反应体系,即使放大到10倍(200 μl反应体系)也不影响mRNA预期产量!
IVT反应液体积与mRNA产量的关系:
此图为以Positive Control Template(FLuc)为模板,加入 CleanCap Reagent AG (3'OMe)进行IVT放大实验(除反应液量外均按说明书所述进行)。由此可见,mRNA产量与反应体积成正比,并且按比例放大反应溶液体积,不会影响mRNA产量。
 
优势No.4:独立包装的NTPs,方便修饰NTPs替换,且不影响mRNA产量。
试剂盒包含独立包装的NTPs,方便优化或使用修饰NTPs(如假尿苷)进行替换,而且不会明显降低mRNA的产量。
为什么要使用修饰的NTPs?
人体免疫系统会识别进入人体的各种物质并将其清除,RNA也不能例外。而人体中本身就有的RNA,却不会被人体免疫系统识别清除,如tRNA。经科学家们研究发现这些tRNA上的尿苷和体外合成实验获得的RNA上的尿苷结构稍有不同,称之为假尿苷。而使用这种修饰的UTP,可以解决mRNA易被免疫系统识别后清除的问题。
 
优势No.5:使用氯化锂(LiCl)溶液进行RNA纯化,可立即进行下游应用。
本试剂盒除了提供用于IVT反应后消化模板DNA的DNase I,还提供了用于纯化mRNA的氯化锂 (LiCl) 溶液,纯化效果更加理想!
氯化锂沉淀法与离心柱法进行RNA纯化的比较(Fluc mRNA)
在含有CleanCap Reagent AG(3'OMe)和N1-甲基假尿苷的IVT反应溶液中合成FLuc mRNA,并分别通过LiCl沉淀法和离心柱法进行纯化(NucleoSpin RNA Clean-up)。结果显示,用离心柱法仅一次洗脱(Elutionx1)得到的RNA要比LiCl沉淀法要少,但两次洗脱(Elutionx2)的RNA量与LiCl沉淀法大致相同。所以使用离心柱法时我们建议进行两次洗脱,而氯化锂沉淀法仅需一次即可。
 
【相关产品】了解更多关联产品信息!
Code No. 产品名称 包装量 说明
6141 Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System 1 Kit 套装产品,包含6143+6144
6143 Cloning Kit for mRNA Template 10 Rxns 构建IVT反应模板质粒,可单独购买
6144 Takara IVTpro™ T7 mRNA Synthesis Kit 20 Rxns RNA合成试剂,可单独购买
1060A Hind III 10,000 U 用于线性化处理IVT反应模板质粒
1060B

10,000 U×5

2541A T7 RNA Polymerase ver.2.0 20,000 U 优化的T7 RNA聚合酶,性能更强
2450A Pyrophosphatase (inorganic) 10 U 用于分解RNA合成中的副产物无机焦磷酸盐(PPi),促进合成反应顺利进行
2450B 10 U×5
 
【Takara其它创新奖参选产品简介】
Takara LVpro™ Packaging Mix with pLVpro系列载体
创新点:LVpro第三代慢病毒包装系统,使用HIV-1 tat非依赖性第三代慢病毒载体,将HIV-1来源序列排除到极限,提高安全性,提升临床研究使用可能性,同时优化了包装系统,有助于获得高安全性、高效价的慢病毒。
 
Takara SMART-Seq Human BCR (with UMIs)
创新点:整合SMART全长cDNA合成技术和5’RACE技术,可以捕获BCR完整V(D)J可变区,提供了一种灵敏、准确、优化的BCR库分析方法。同时包含UMI用以去除PCR偏差及测序错误,提供更正确和可靠的结果。特别开发的Cogent NGS Immune Profiler Software能直接对下机数据进行高品质的BCR profiling分析。
 
Takara SMART-Seq mRNA LP (with UMIs)
创新点:SMART-Seq mRNA LP (with UMIs)是一款mRNA-Seq文库构建试剂盒。该试剂盒使用高灵敏度的SMART-Seq技术,并添加了UMI,可以进行高准确性的Ultra low RNA全长转录组分析。该试剂盒优化用于从10 pg-100 ng的高品质total RNA(RIN≥8)或1-1000个完整细胞起始,生成高质量的测序文库。
 
TaKaRa Ex Premier™
创新点:TaKaRa Ex Premier™是集高成功率、高保真性、高收量和快速扩增于一体的PCR酶,即使是粗提样品、GC/AT rich、长链(~30 kb)等难扩增的模板依然能够从容应对,可实现高保真、高成功率的扩增,可谓一个对策解决您的多种需求,助力您的PCR实验一站成功。
 
希望这些具有创新性的产品能够为您的科研工作提供助力。Takara将一如既往地提供高质量的生物科技研究工具和专业的技术分享,与您一起探索生命科学的奥秘与奇迹!
 
 

页面更新:2023-02-16 16:29:20