| 选对风口扶摇直上，Takara为抗体药物研发提供新思路！ |
| 20世纪70年代，科学家们将可产生特异性抗体的B细胞与骨髓瘤细胞融合，获得了可以产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，从而建立了单克隆抗体制备技术。由于每个杂交瘤细胞由一个B细胞融合而成，而每个B细胞克隆仅识别一种抗原表位，因此经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成和分泌识别单一抗原表位的特异性抗体，称为单克隆抗体。【1】 |
| 单克隆抗体具有高特异性、高活性、良好的药代动力学特性等特点，因而在癌症以及神经退行性疾病的治疗中占据重要位置。然而如何快速有效的筛选单克隆抗体对于抗体药物的研发是至关重要的。我们先来了解一下抗体药物筛选的流程： |
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| 抗体药物筛选通常的工作流程包括从B细胞扩增分离可变区的cDNA，然后将这些区域克隆到表达载体或做相应的分析以便于下一步应用，在表达后进一步纯化、筛选表达的抗体并验证其与靶点的相互作用。 近年来抗体类药物行业发展迅猛，国内外市场前景广阔，毫无疑问是即将起飞的风口行业。 Takara针对抗体药物筛选流程中涉及的大量的序列调取、克隆、表达以及纯化操作，可提供巧妙、高效、快速的方法，为进行抗体药物研发提供新的思路和解决方案！ |
| SMARTer RACE cDNA合成技术助力快速分析抗体可变区序列 |
| 由于抗原抗体结合的特异性取决于抗体可变区的特异结构，所以分析可变区的序列是很多应用的第一步，包括用噬菌体展示文库筛选单抗以及对抗体可变区的优化。分析可变区时，设计一个通用引物来扩增所有抗体序列是非常困难的，因为重链和轻链5’端的天然可变性决定了序列同源性很低，一个有效的方法是在可变区下游的保守区设计简并引物，后续使用5’RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)的方法克隆这段目的区域，之后再进行测序。但普通的RACE方法常有扩增序列较短或操作步骤繁琐的缺点，因此错过了重要信息。 Takara的SMARTer RACE cDNA合成技术可为抗体可变区的全长序列分析提供简单、灵敏、高效的解决方案。SMARTer RACE cDNA扩增试剂盒，结合了Clontech特别的SMARTer（5'末端RNA模板转换机制）技术，允许反转录酶达到转录本的5'末端，不需要adaptor连接等步骤，整个流程更快、更易操作，有效合成全长cDNA，大大减少了非特异性背景并提高了扩增效率。 |
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| In-Fusion方法助力抗体序列的高通量快速克隆 |
| 在抗体药物研发的初期，研究人员需要预测和筛选大量的抗体药物靶标，进而发现关键的靶点，这少不了抗体基因片段的克隆表达。你还在苦恼于大片段连接效率低、缺乏方向性以及实验耗时长的传统酶切连接的克隆方法吗？Takara的In-Fusion Cloning是一种无需连接酶、高效率的无缝克隆技术，基于载体和插入片段序列之间的同源重组原理，有助于快速、高效地将任意PCR片段克隆到任意目的载体中，背景低，克隆保证方向性，单片段克隆的成功率超过95％。In-Fusion克隆的快速和易用性以及结果的正确性，使系统可轻松应对高通量的工作流程。 或许研究某一个抗体时，传统酶切酶连的克隆方法耗时长还勉强可以接受。但如果您需要扩展至成百上千个克隆的高通量应用时问题就比较严重了，因为扩大化该工作流程就意味着扩大其潜在问题和增加了大量的故障排除工作。更何况药物研发分秒必争，既然现在有更加高效的方法，又岂能被轻易拖住脚步？ |
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| Capturem™ Protein A/Protein G系列产品助力抗体的快速高通量纯化 |
| 完成抗体的表达之后，往往离不开抗体纯化的操作步骤。常规树脂纯化方法预处理和纯化时间长，柱床体积大，并且对操作环境和操作设备都有较高要求，不便于开展大规模小量样品的筛选和验证性实验，往往成为限速步骤，即使是选择操作较为简便、耗时较短的磁珠纯化法，也难免实验前要对磁珠进行分装、预处理，实验中要进行的孵育以及频繁的移液操作。 明明有了In-Fusion快速高效的克隆方法，却要在抗体纯化上消耗大量人力和时间，这叫人如何甘心！Takara的Capturem™ Protein A 和Protein G系列产品可以为抗体纯化提供快速高通量的解决方案。该系统基于Capturem膜技术，膜上偶联能够特异性的与IgG的Fc片段结合的ProteinA或ProteinG，可满足抗体小量快速纯化和96 well大规模快速筛选，兼具快速、易用、灵活和高产量（与同等体积树脂比较）等特点，可以显著提高抗体纯化实验速度，对抗体药物临床前研发的进程起到推动作用！ |
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| Capturem™ Trypsin/Pepsin蛋白质快速酶解消化产品助力抗体质谱检测 |
| 使用质谱（MS）对抗体药物进行准确的定性以及定量已经成为抗体药物研发过程中必不可少的环节。质谱分析中最重要的步骤是样品制备，需要将蛋白质转化为肽。Takara的Capturem™ Trypsin和Capturem™ Pepsin可快速、有效地消化蛋白质样品，在室温下让MS工作流程更加连贯。该系列产品应用我们的新型Capturem膜技术，膜上固定有胰蛋白酶（Trypsin）或胃蛋白酶（Pepsin），仅需2-3分钟的时间即可高效消化蛋白质样品，能进行独立样品酶解，也可进行96-well的高通量酶解操作。不仅可以节省时间，还可以通过减少胰蛋白酶自溶来改善蛋白质组学分析中肽和蛋白质的鉴定。 |
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| 伴随着人类基因组学及代谢组学的发展，越来越多的单克隆抗体药物新靶点将被发现和研究，单克隆抗体药物的种类未来也会继续增多！Takara一直助力于单克隆抗体筛选研究，为您抗体药物筛选工作提供高效、快速的解决方法，是您的新药研发工作重要的攻坚利器！ |
| 【1】于爱莲，王月丹主编；田喜凤等副主编 ．病原生物与免疫学．北京：北京大学医学出版社，2015.06：第316-322页 |
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