分子克隆是基因重组和基因工程表达研究中必不可少的步骤之一,它很普通,普通到几乎每个项目都会用到;它又很难缠,一旦落入反复切切连连的循环,实验进度就会分分钟被无情的“锁喉”! 但自从有了无缝克隆技术,一切开始变得不同! 无缝克隆技术不同于传统的酶切连接方法,它利用载体和插入片段末端的同源序列,在特定酶的作用下,可对任意载体的任意位点随心所欲的插入外源序列。这仿佛打开了克隆实验的“任意门”,也开启了克隆实验的新时代。 Takara公司的In-Fusion技术一直默默深耕相关市场,其In-Fusion HD系列试剂已助力无数科研人员顺利突破克隆实验障碍,见证了一代又一代科研人的成长,也目睹了一批又一批后辈的崛起。 真是铁打的In-Fusion,流水的paper啊! 但这世界上,又有什么是永恒不变的呢? 就像这多年未曾改变的In-Fusion 产品线,竟然在前几天推出了新品In-Fusion Snap Assembly系列。 |
分分钟读懂In-Fusion Snap Assembly |
////首发阵容//// |
有何过人之处? 与现有的HD系列对比: · 货号变了,名字变长了 · 拥有HD系列的一切性能优点,实验操作步骤与HD系列相同 · 首发阵容为In-Fusion Snap系列中性价比最高的基础款Master Mix,大包装规格增量为250次 · 比HD系列效率更高,克隆菌落数更多,正确率更高,多片段连接更出色 · 比HD系列一致性更好,高通量转换更灵活 |
用数据说话 |
In-Fusion Snap Assembly和In-Fusion HD性能比较。分别使用In-Fusion Snap Assembly和In-Fusion HD将五个不同的插入片段(大小从405 bp到1,005 bp不等)同时克隆到一个经反向PCR线性化的2.7 kb的载体中,每组克隆反应重复三次。两个反应系统除了酶预混液不同之外,扩增引物和其他试剂全部相同。转化涂菌后显示Snap Assembly组长出的菌落数是HD组的4倍,进一步使用Sanger测序法对转化菌落进行验证,结果显示二者正确率均超过90%。此外,Snap Assembly的批间一致性要显著高于HD系列(数据未显示)。 |
数据来源于Takara Bio USA, Inc. |
In-Fusion Snap Assembly和N公司的试剂性能对比(使用反向PCR的方法线性化载体)。 将3.8 kb的片段(图A)或34.2 kb的腺病毒片段(图B)克隆到通过反向PCR线性化的2.7 kb的载体中,每组克隆反应重复三次。引物按照所使用试剂厂家的要求进行设计。 转化涂菌后显示In-Fusion Snap Assembly组长出的菌落数是N公司试剂组的2倍,再使用Sanger测序法和菌落PCR的方法分别对3.8 kb插入片段组和腺病毒插入片段组长出的菌落进行验证,结果显示In-Fusion Snap Assembly的正确率超过95%。 |
如果使用限制酶酶切线性化载体,In-Fusion Snap Assembly的表现将更加惊艳,点击In-Fusion Snap Assembly产品页面查看更多实验例。 |
页面更新:2020-10-30 16:15:56