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| 技术控：如何使用智能手机10分钟解锁慢病毒滴度 |
| 近几年来，重组慢病毒载体已经成为一种非常通用的病毒基因导入工具，从基础研究到临床应用逐渐被广泛应用。使用重组慢病毒载体，可以将外源基因非常高效地转导至靶细胞中，实现稳定持续表达目的基因的效果。病毒滴度是慢病毒成功转导的关键因素。在这些应用中，需要准确地确定病毒载体的感染滴度，因为这将有助于提高转导效率以及转导细胞内的最终整合拷贝数。 不过，慢病毒滴度测定是一项费时费力的工作。根据所选择的方法不同，时间跨度从数小时到2周不等，操作复杂程度也因选择方法的不同而不同。为了进一步简化病毒滴度测定操作过程，缩短检测时间，Takara Bio公司开发出了Lenti-X GoStix Plus快速检测方法，能够以智能手机作为数据读取和分析工具，在十分钟之内定量检测重组慢病毒滴度，而不需要购买检测仪器。 Lenti-X GoStix Plus这种智能化快速检测方法，主要由Lenti-X GoStix Plus验毒棒和一款智能手机免费应用程序Lenti-X GoStix APP组成。Lenti-X GoStix Plus验毒棒可检测慢病毒衣壳蛋白质p24的存在，之后通过智能手机免费应用程序量化病毒滴度。使用这款智能手机应用程序，可以对慢病毒p24蛋白质的侧向层析检测进行分析，在10分钟内提供检测结果。 |
| Lenti-X GoStix Plus |
| ★ 构思巧妙，基于侧向层析检测技术开发 |
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| 目前研究用重组慢病毒载体所包含的主要结构蛋白质，包括包膜蛋白质、基质蛋白质、病毒核心蛋白质。p24是构成慢病毒粒子衣壳的一种主要结构蛋白质，由gag基因编码表达(同时表达核衣壳蛋白质p6和p7，基质蛋白质p17）。p24蛋白质的表达水平可以直接反映出病毒感染滴度高低。 Lenti-X GoStix Plus验毒棒基于侧向层析检测技术开发，可以快速检测慢病毒上清液中的p24蛋白质，通过测定慢病毒上清液中p24衣壳蛋白质的含量来确定慢病毒滴度。验毒棒检测框中Test指示条带的出现，说明样本中含有足够用量的慢病毒粒子，然后使用智能手机上的免费应用程序Lenti-X GoStix APP量化慢病毒滴度。 |
| 点击观看Lenti-X GoStix Plus操作视频，2分钟get操作要点。 |
| ★ 手段智能，以智能手机APP为量化手段 |
| 使用智能手机免费应用程序对检测结果进行量化，获得准确的慢病毒滴度。 这款专门量身定制的智能手机应用程序，被命名为Lenti-X GoStix，使用免费，在iOS和Android设备上都能运行。使用这款应用程序，可以同时运行最多4个检测，只需要对每个检测进行对应命名，逐个扫描检测结果即可。 使用Lenti-X GoStix Plus，不需要自己建立标准曲线。Takara Bio事先为每个批次的Lenti-X GoStix Plus建立了标准曲线，打开Lenti-X GoStix APP并将移动设备连接到互联网，在输入批号或者扫描批次二维码后，会自动加载指定批号的标准曲线。这不仅可以缩短实验时间，降低实验成本，还可以更大限度地确保不同批次和不同实验间检测结果的准确性。Lenti-X GoStix APP可以记录保存每次的检测结果，为了避免数据丢失，检测人员也可以通过电子邮件将检测结果发送给自己便于保存记录。 |
| （Lenti-X GoStix APP版本升级中，操作指导视频敬请期待……） |
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| ★ 检测快速，10分钟完成滴度测定 |
| 使用Lenti-X GoStix Plus可以在10分钟完成慢病毒滴度测定。传统的滴度测定方法，如qPCR、ELISA或功能分析方法，不仅耗时长而且操作繁琐，不适用于监测上清液以确定最佳的病毒收获时间，也不适用于同时检测多个样本。Lenti-X GoStix Plus配合使用Lenti-X GoStix Plus验毒棒和Lenti-X GoStix APP，可以在10分钟内完成滴度测定。使用该应用程序的结果记录和邮件发送功能，还可以快速高效记录多个时间点和多个样本的检测结果。 没有对比就没有伤害。来，感受下。↓↓↓ |
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| 上图比较了用Lenti-X-GoStix Plus和几种常用经典方法，测定慢病毒滴度所需要的时间（以小时为单位）。在这些检测方法中，使用Lenti-X-GoStix Plus进行检测耗时最短。①Lenti-X-GoStix：本文所介绍的基于侧向层析检测技术的慢病毒上清液中p24的检测方法；②qRT-PCR：通过qRT-PCR定量测定病毒RNA基因组；③ELISA：测定慢病毒衣壳蛋白质p24的含量；④PCR：通过qPCR检测整合DNA前病毒；⑤IFU（FACS）：通过流式细胞仪分析RFP（红色荧光蛋白质）/GFP（绿色荧光蛋白质）阳性细胞确定感染细胞占总细胞数的百分比；⑥IFU（筛选）：通过量化感染细胞群中耐药细胞克隆的数量来确定感染单位。 |
| ★ 节约样品，只需要20 μl上清液 |
| 使用Lenti-X-GoStix Plus测定慢病毒滴度，每次检测只需要20 μl上清液作为检测样品，节约样品用量。您只需将20 μl包装细胞上清液，添加至GoStix验毒棒的上样孔中，再滴加3滴缓冲液，等待5-10分钟。Test指示条带出现后，使用APP扫描检测结果。 |
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| 如此看来，智能手机不仅渗透入了生活和工作的各个方面，让我们的生活工作更加便捷高效。也在影响着我们的科研工作，让我们可以突破常用传统方法的限制，更加便捷快速地开展科研工作。 |
| 更多慢病毒滴度测定方案 |
| 关于重组慢病毒滴度测定，除了Lenti-X GoStix Plus这款更快速、更智能的慢病毒滴度测定试剂盒之外，Takara Bio还可以提供经典的ELISA和qRT-PCR检测方法试剂盒。 |
| ● Lenti-X p24 Rapid Titer Kit |
| 通过ELISA方法特异性检测重组慢病毒载体衣壳蛋白质p24，通过与试剂盒中提供的p24标准品制作的标准曲线相比较，就可以获得检测样品的病毒滴度。 · 通过简便的ELISA方法快速测定病毒滴度 · 4小时可完成病毒滴度测定 |
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| ● Lenti-X qRT-PCR Titration Kit |
| 该试剂盒通过qRT-PCR方法检测上清液中的病毒基因组拷贝数，快速测定慢病毒滴度。将样品和试剂盒中提供的标准品RNA进行梯度稀释，然后分别进行qRT-PCR反应后绘制曲线。通过与标准曲线的Ct值比较，就可以获得样品所包含的病毒拷贝数。 · 通过一步qRT-PCR方法快速测定病毒滴度 · 4小时可完成病毒滴度测定 |
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| 点击下方图片，下载《Lenti-X™慢病毒系统和工具》，了解更多重组慢病毒基因导入系统和关联工具。 |
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| 了解更多详情和性能表现，请点击：Lenti-X GoStix Plus |
页面更新：2020-11-30 16:29:00
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