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复工复学在即,课题研究方向还没确定?
来看看酵母杂交技术在植物研究领域有哪些应用!
2020年,是注定让人难忘的一年。然而历经数月之后,生活又走上了正轨,紧张严肃的实验生活又要开始了。
有的同学们可能要犯愁了,课题方向还没有确定,下一步该进行哪些实验?有哪些技术需要提前了解一下?
生命科学技术一直在进步,但万变不离其宗,科研之路上总是少不了对蛋白质的研究,尤其是蛋白质的相互作用,发现蛋白质相互作用对科学家们研究动、植物生理功能有着重要的意义。而说起常见的蛋白质相互作用研究方法,就不得不提一提酵母双杂交技术了。
 
上次我们介绍了酵母杂交技术在病毒-宿主蛋白质互作研究领域的应用
 
这次我们就来看一下在植物研究领域,酵母杂交技术都有哪些应用。
 
【揭示盐胁迫抑制水稻生长的重要机制】
水稻作为一种重要粮食作物,是人类赖以生存的口粮之一,世界上近一半的人口以大米为主食。然而水稻虽好,但并不是所有的土地都适合耕种,尤其是在含盐量高的土地上。接下来这篇文章就揭示了盐胁迫环境下水稻生长的机制:
Wang J , Qin H , Zhou S R , et al. The Ubiquitin-Binding Protein OsDSK2a Mediates Seedling Growth and Salt Responses by Regulating Gibberellin Metabolism in Rice[J]. The Plant Cell, 2019, 32(2).
研究者采用酵母双杂交(Y2H)的方法(Takara,Matchmaker® Gold酵母双杂交系统),以OsDSK2a蛋白质作为诱饵蛋白质,成功筛选出了与它具有相互作用的蛋白质EUI。而EUI蛋白质可以影响赤霉素代谢影响植物生长,研究者由此揭示出盐胁迫环境下水稻生长的重要机制,为作物耐盐性育种提供了新的思路。
 
【揭示青蒿素生物合成调控机制】
青蒿是我国传统的中草药,提起它就不由得让人联想到了诺奖得主屠呦呦,她根据古方成功提取了青蒿素,而目前青蒿素及其衍生物是治疗疟疾的有效药物。
青蒿素虽好,但令人头疼的是它的产量不高,因此如何提高青蒿中的青蒿素含量成为了相关研究的热点。接下来这篇文章研究者以茉莉酸的信号途径为切入点,从青蒿素合成代谢转录调控着手研究,揭示了转录因子AaMYC2在青蒿素生物合成的重要作用。
Shen Q , Lu X , Yan T , et al. The jasmonate-responsive AaMYC2 transcription factor positively regulates artemisinin biosynthesis in Artemisia annua[J]. New Phytologist, 2016, 210(4):1269-1281.
在此研究中,研究者采用酵母双杂交(Y2H)方法确认AaMYC2与相关生长素的调控因子都具有相互作用,由此证明AaMYC2转录因子在植物激素信号转导中起到重要作用。后续通过酵母单杂交(Y1H)的方法(Takara,Matchmaker® Gold酵母单杂交系统)进一步分析发现AaMYC2转录因子可以直接结合G-box-like元件,从而调控青蒿素合成。由此揭示了AaMYC2参与青蒿素生物合成调控的机制。
 
我们来看一下这两篇文章所用到的酵母杂交产品:
Matchmaker® Gold Yeast Two-Hybrid System
 
· 可以用于蛋白质相互作用的确认以及研究工作
· 3个启动子4个报告基因,多个报告基因共同作用,有效降低假阳性出现的概率
· 简便的“Mating”接合方法完成文库筛选
· 从建库产品到培养基、酵母转化试剂、筛选试剂,具有完备的配套产品可供选择
 
使用Matchmaker® Gold Yeast Two-Hybrid System,您也一样可以从突变植株中找出有趣的目标蛋白质,并以此为诱饵蛋白质从文库中筛选出互作蛋白质,自然界的物种何其之多,也许从海量的筛选中恰好能做出一些重要的发现!
 
 
Matchmaker® Gold Yeast One-Hybrid Library Screening System
 
· 可用于DNA和蛋白质相互作用的研究
· 基于同源重组的方法将目标DNA构建到酵母菌Y1H Gold基因组中
· 可以在酵母体内直接完成文库构建和筛选
· 加入金担子素A抗性筛选基因,有效消除背景克隆
 
使用Matchmaker® Gold Yeast One-Hybrid System,您也可以开展DNA-蛋白质相互作用研究,揭示出一些感兴趣的基因元件和转录因子在生物合成过程中的重要机制。
 
 
最后,看了这两篇植物学相关的文献,您是不是觉得思路大开,灵感涌现?那就不要犹豫,赶快开始您的实验设计吧!
 
 

页面更新:2020-06-08 13:51:35