| 原理都懂，就是分化不出满意的肝脏细胞，怎么破？ （“肝脏细胞模型”专题之03篇，进度条3/5） |
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| 人iPS细胞来源肝脏细胞作为新型的肝脏细胞模型，因为其可以持续供应相同遗传背景的肝脏细胞而备受瞩目。But，除了直接购买商品化人iPS来源肝脏细胞以外，如何在实验室分化出特定供体来源的肝脏细胞呢？ | ||||||
| ■ 揭秘定向分化心法先 | ||||||
| 心法1：高度同质化的起始细胞 心法解读：起始的多能干细胞处于同一生长时期，拥有良好的未分化状态和增殖状态，无背景分化，同步接受后续的分化诱导。 心法2：模拟胚胎发育进程 心法解读：通过添加或调整不同分化阶段的分化诱导试剂，模拟胚胎内的时序变化，不建议使用自发分化的方法（如通过拟胚体EB分化）。 |
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| ■ Takara肝脏分化试剂盒：您只管按照Protocol做，分化不出满意的肝脏细胞算我输！ | ||||||
| 如果您读了专题02篇：《用实力说话，Takara想凭这些数据在肝脏细胞模型界出道》，我想您可能会感慨这些Takara的iPS细胞来源肝脏细胞（Cellartis® Enhanced hiPS-HEP v2 Kit）简直就是别人家的孩子，表达肝脏细胞标志物，显示葡萄糖、脂质代谢调控，具备药物代谢机制相关的CYP活性、II相酶活性等，我们在实验室做不到啊…… 没错，这确实要归功于Takara稳定的肝脏定向分化Protocol，不过，这一定向分化方法，我们也做成了商品化的试剂盒在销售。当当当当！它就是： |
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| ■ 技术特点一览： | ||||||
| 灵活：使用自定义的人iPS细胞来分化（Takara也有多款人iPS细胞在销售） 方便：完整的试剂盒，无需另购试剂；均为即用试剂，无需花时间配制 稳健、易操作：提供标准的操作步骤，无需优化，多种人多能干细胞系测试验证 稳定的功能特性：与人原代肝脏细胞功能相似，详见专题02篇 |
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| ■ 实验操作一览（建议对照心法理解）： | ||||||
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| 人多能干细胞（ESCs/iPSCs）培养系统，呈现均匀地、非集落状地、单层生长模式，无集落边缘（集落边缘容易出现分化），确保起始细胞处于高度同质化。 | ||||||
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| 定型内胚层分化试剂盒，支持人多能干细胞向定型内胚层（DE）细胞逐步分化，对应更换试剂盒中第0/1/2/3/4/6天的DE分化诱导试剂，诱导周期是7天。 | ||||||
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| 肝脏分化试剂盒，支持DE细胞向肝脏细胞定向分化，逐步更换试剂盒中的起始培养基（第7天）、前体培养基（第9/11天）、成熟培养基（第14/16天）、维持培养基（第18天及后续），到第21天时，呈现典型的肝脏细胞形态，纯度高达90%。试剂盒中提供的培养基可支持培养至第32天。 | ||||||
| ■ 这波操作真有这么稳吗？ | ||||||
| 以下这篇文献Asplund et al. (2015)中，使用Takara的Cellartis® iPS Cell to Hepatocyte Differentiation System（Y30050）成功将多种人iPS细胞系、ES细胞系分化至肝脏细胞，您就瞧好吧。 | ||||||
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| 欢迎来电咨询（联系电话：010-80720985），询价或订购可直接联络Takara当地代理商。 | ||||||
| ■ 关注Takara“肝脏细胞模型”专题，了解Takara完善的肝脏细胞解决方案。 《01篇：“前浪、后浪”，能长时间维持肝脏细胞功能特性的就是好模型》 《02篇：用实力说话，Takara想凭这些数据在肝脏细胞模型界出道》 《03篇：原理都懂，就是分化不出满意的肝脏细胞，怎么破？》 《04篇：天啦噜，这款人原代肝脏细胞培养基简直Amazing! Unbelievable！》 《05篇：终篇干货，Takara肝脏细胞模型产品指南，请多指教》 |
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页面更新：2023-04-19 09:11:00
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