扩增片段长度的确认(Code No. R026A/B)

 
[方法]
以人心脏及小鼠心脏来源的total RNA和HL60细胞来源的total RNA为模板(1 μg/50 μl反应体系)、使用1 step RT-PCR对不同长度的目的片段进行扩增。
 
反应条件:
                               45℃ 10 min(注意12 kb时为15 min.)
                               94℃ 2 min
                                   ↓
98℃ 10 sec.   30 cycles
55℃ 15 sec.(注意8、12 kb时为60℃)  
68℃ 10 sec./kb  
 
 
[结果]
确认能够扩增0.5~12 kb的片段。