粗提样品扩增实验例4:植物叶片经Plant DNA Isolation Reagent简易制备提取液

MightyAmp DNA Polymerase(Code No. R071A/B)、PrimeSTAR GXL DNA Polymerase(Code No. R050A/B)
 
Takara Bio的Plant DNA Isolation Reagent(Code No. 9194)是以氯化苄法为基础构建的ready-to-use试剂,仅通过简单的操作就可以提取获得植物样品中的基因组DNA。使用本试剂简易制备的DNA溶液,由于含有一定量的植物来源的PCR阻害物质,以此为模板进行PCR时推荐使用TaKaRa Ex Taq Hot Start Version、MightyAmp DNA Polymerase、或PrimeSTAR GXL DNA Polymerase。
 
方 法: 以拟南芥幼叶、番茄幼叶、或者菠菜的成熟叶片提取的基因组DNA溶液为模板,以各酶推荐的反应条件进行PCR反应,经电泳确认扩增条带。
目的基因与扩增大小: 拟南芥MERI5B基因(约1.0 kb)、番茄XET基因(约0.6 kb)、菠菜coxI基因(约0.5 kb)
使用量 基因组DNA提取原液或稀释液分别取2 μl/25 μl反应体系
Lane 1:原液  2:2倍稀释液  3:5倍稀释液  4:10倍稀释液  5:20倍稀释液  6:40倍稀释液  M:250 bp DNA Ladder