Takara

粗提样品的扩增2：植物叶片的热提取液

MightyAmp DNA Polymerase（Code No. R071A/B）

方法

在5 mm的菠菜叶和西红柿叶中添加100 μl 溶解试剂（100 mM Tris-HCl pH9.5、1 M KCl、10 mM EDTA），95℃孵育10分钟。分别以1 μl各提取液为模板（25 μl反应体系），使用本酶、A公司抗阻害物PCR酶和TaKaRa Taq Hot Start Version（TaKaRa Taq HS）（Code No. R007A），在各自推荐的PCR反应条件下对菠菜coxl基因（0.5 kb）和西红柿XET 基因（0.65 kb）进行了PCR扩增。取5 μl反应液进行电泳，对反应性能进行了比较。以纯化的50 ng基因组DNA为模板进行了相同的PCR反应作为对照。

结果

使用A公司抗阻害物酶和TaKaRa Taq HS，只有以菠菜和西红柿的纯化DNA为模板才可获得扩增产物，而使用MightyAmp DNAPolymerase，以简单的热提取液为模板即可获得扩增产物。