Direct PCR 实验例2:小鼠组织

MightyAmp DNA Polymerase Ver.2 (Code No. R071A/B)
 
 
· 各种组织(1.5 mm3)直接添加到50 μl反应体系中
· N=2进行反应
· 目的基因:小鼠Hbb-b1 gene 542 bp
· 使用各酶的推荐条件进行PCR反应、4 μl电泳
· MightyAmp Ver.2的PCR条件
                  98℃ 2 min  
                       ↓
98℃ 10 sec.   30 cycles
60℃ 15 sec.  
68℃ 30 sec.  
 
· 使用TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Gradient(Code No.TP600)
 
Lane 1:MightyAmp Ver.2
      2:A公司动物组织用PCR酶
      3:B公司抗阻害物PCR酶
      M:pHY Marker
 
凝胶:1% Agarose L03「TAKARA」 
 
*直接对组织进行PCR得到的PCR产物进行电泳时,需要在Loading Buffer中添加Proteinase K(Code No. 9034)。
以小鼠组织片为模板直接添加到反应体系中进行direct PCR,相比于其他公司的动物组织用PCR酶或抗阻害物的PCR酶,MightyAmp Ver.2显示了很高的扩增效率。