挑取菌落&PCR

 
【方法】
plasmid: 8 kb insert in pUC18
宿主: JM109菌株
primer: M13 primer M4 and RV
polymerase: Z-Taq(2.5 U/μl)
 
在培养板中用牙签挑取菌落后悬浮于100 μl dH2O中。取10 μl作为PCR反应的模板:
 
PCR反应条件
98℃ 5 sec.   25 cycles(约60 min)
55℃ 5 sec.  
72℃ 90 sec.  
 
(TaKaRa Thermal Cycler PERSONAL, Fast mode)
 
【结果】