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当前位置:首页 > 技术资料 > 相关问答 > Takara > 蛋白质纯化、分析和检测 > Yeast Protein Extraction Reagent
Q-1:Yeast Protein Extraction Reagent是否对所有酵母菌都适用?
A-1:

一般情况下,Yeast Protein Extraction Reagent适用于所有对酵母菌破壁酶敏感的酵母菌细胞的Protein提取。我们使用本制品对Pichia(GS115、X33)、Saccharomyces(Y187、AH109)以及Candida(Tropicalis)进行了蛋白质的成功提取。下表是文献中报道的利用Yeast Protein Extraction Reagent能够成功裂解酵母菌细胞壁的菌种一览表。

 
 菌 种 名 称
 1. Shizosaccharomyces  10. Graphiola phoenicis
 2. Saccharomyces cerevisiae  11. Brettanomyces bruxellensis
 3. Hansenula marakii  12. Candida colliculosa
 4. Kluyveromyces lactis  13. Tremella mesenterica
 5. Pichia anomala  14. Candida utilis
 6. Lipomyces starkeyi  15. Kloeckera apiculata
 7. Filobasidium floriforme  16. Trigonopsis variabilis
 8. Ustilago maydis  17. Cryptococcus albidus
 9. Rhodosporidium toruloides  18. Phaffia rhodozyma
 
Q-2:细胞不能完全裂解?
A-2:

细胞数量太多会导致裂解液不能完全裂解细胞。如果初始加入的细胞过多会使反应液变得十分粘稠,而细胞则会聚集成团,使裂解作用不充分。在此种情况下可以将Yeast Protein Extraction Reagent的量加倍,以达到完全裂解的效果。

Q-3:蛋白质提取量较低,怎么办?
A-3:

① 细胞未能完全裂解。一般来说,每25 μl的Yeast Protein Extraction Reagent可以对1~5×106的细胞进行裂解,得到约2.5 mg/ml的酵母菌蛋白质。如果加入的细胞数量过多,会造成蛋白质提取量下降。如果菌体量增加,请相应增加裂解用的Yeast Protein Extraction Reagent的使用量。
② 菌体不新鲜。提取用菌体的OD600值超过对数生长期会造成提取蛋白质的量和质发生变化,一般建议在酵母菌的对数生长期时收集菌体,进行蛋白质提取,此时效果较佳。

页面更新:2020-05-11 14:39:35