使用本试剂盒要特别注意干燥步骤。因为该方法提取的DNA较大，完整性好，所以请一定不要干燥过度。Tube中看不到有明显的液体或没有乙醇气味后，就可以加入TE Buffer进行溶解。如果沉淀已经变白，说明干燥过度，此时加入TE Buffer，可能沉淀不能完全溶解，DNA的收量可能会受到影响。
本试剂盒适合于动物组织、一般植物材料、全血、培养细胞、革兰氏阴性菌的基因组DNA提取。基因组DNA的提取量根据组织材料的不同而各异，一般情况下，从10 mg的肝脏组织中，可以提取约5 μg的基因组DNA；从100 mg的菠菜中，可以提取约5 μg的基因组DNA；从100 μl的人全血中，可以提取约0.5 μg的基因组DNA；从2.0E+06的培养细胞中，可以提取约10 μg的基因组DNA；从2.0E+09的E.coli细胞中，可以提取约10 μg的基因组DNA。
基因组DNA收量较低时，可以从以下几个方面考虑：
① 实验材料量太少，比如从2×103培养细胞中提取的基因组DNA就不能用电泳检测到；
② 裂解不充分，DNA未充分释放，建议要延长裂解时间（过夜裂解）或增加裂解液的量；
③ 提取的组织材料中基因组DNA含量较少，适当增加起始组织量；
④ 起始组织量过大，裂解困难，按比例适当增加裂解液的加量或分成多份进行提取；
⑤ 洗脱时将灭菌蒸馏水或Elution Buffer加热至65℃后使用将有利于提高洗脱效率；
⑥ 请严格按照操作方法进行操作。
① 选取的实验材料不够新鲜，采集后的组织材料未及时处理或未低温保存。我们建议材料应尽量在-80℃保存，运输过程中亦应使用干冰等。
② 材料本身有残留的DNA酶活性。可以增加一次Buffer WA的清洗操作。
① 实验过程中没有使用RNase A。应严格按照实验操作要求使用RNase A。
② RNase A可能失活。RNase A尽可能在-20℃下保存，RNase A活性比较稳定，一般不易失活。
① 提取的基因组DNA中盐份浓度过高。在使用Buffer WA和Buffer WB进行DNA制备膜的清洗时，请沿Spin Column的管壁四周加入，且加入Buffer WB后室温静置5分钟，有助于彻底清洗掉Column上残留的盐离子，这样有利于提高清洗效果。
② 洗脱液中残留乙醇，在向Column中加入洗脱液之前，将Column在室温下静置2分钟有助于使Column上残留的乙醇彻底挥发，然后再加入洗脱液洗脱。
③ 进行DNA洗脱时请一定在膜的中央加入洗脱液，尽量不要沾染Spin Column的管壁四周。
本试剂盒主要用于小量基因组DNA的制备，当实验材料量超出说明书的要求用量时，可以加大Buffer GL或Buffer GB的用量，裂解后分到两个Collection Tube中进行实验操作。起始组织量最好控制在规定范围内，可以分几份进行，否则起始量过大会影响裂解和收量，如果裂解不充分会堵塞柱子，造成实验失败。
有的深加工品材料本身DNA含量非常少，并且加工之后导致DNA断裂，所以电泳时可能检测不到明显的DNA条带，可以直接进行PCR检测。
页面更新：2020-04-29 11:42:46
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