电泳时的DNA分子量Marker和Agarose浓度的选择如下图： |
| DNA片段长度 | Agarose浓度 |
使用Marker种类 |
| 200 bp以下 | 3%以上 |
фX174 Hae III digest DNA Marker
фX174 Hinc II digest DNA Marker DL500 DNA Marker DL1,000 DNA Marker DL2,000 DNA Marker QDL2,000 Quantitative DNA Marker 20 bp DNA Marker(Dye Plus) 50 bp DNA Marker(Dye Plus) 100 bp DNA Marker(Dye Plus) |
| 200 bp～700 bp | 2%～3% |
λ-BstP I digest DNA Marker
фX174 Hae III digest DNA Marker фX174 Hinc II digest DNA Marker DL500 DNA Marker DL1,000 DNA Marker DL2,000 DNA Marker QDL2,000 Quantitative DNA Marker DL5,000 DNA Marker pHY Marker 50 bp DNA Ladder(Dye Plus) 100 bp DNA Ladder(Dye Plus) 200 bp DNA Ladder(Dye Plus) 250 bp DNA Ladder(Dye Plus) 500 bp DNA Ladder(Dye Plus) |
| 700 bp～1,500 bp | 1%～2% |
λ-BstP I digest DNA Marker
λ-EcoT14 Idigest DNA Marker λ-EcoT14 I/Bgl II digest DNA Marker фX174 Hae III digest DNA Marker фX174 Hinc II digest DNA Marker DL2,000 DNA Marker QDL2,000 Quantitative DNA Marker DL5,000 DNA Marker DL10,000 DNA Marker pHY Marker Wide-Range DNA Ladder(50-10,000 bp) 50 bp DNA Ladder(Dye Plus) 100 bp DNA Ladder(Dye Plus) 200 bp DNA Ladder(Dye Plus) 250 bp DNA Ladder(Dye Plus) 500 bp DNA Ladder(Dye Plus) |
| 1,500 bp～5,000 bp | 0.7%～1% |
λ-BstP I digest DNA Marker
λ-EcoT14 I digest DNA Marker λ-EcoT14 I/Bgl II digest DNA Marker λ-Hind III digest DNA Marker DL5,000 DNA Marker DL10,000 DNA Marker DL15,000 DNA Marker pHY Marker Supercoiled DNA Ladder Marker Wide-Range DNA Ladder(50-10,000 bp) 200 bp DNA Ladder(Dye Plus) 250 bp DNA Ladder(Dye Plus) 500 bp DNA Ladder(Dye Plus) 1 Kb DNA Ladder(Dye Plus) |
| 5,000 bp以上 | 0.7%以下 |
λ-EcoT14 I digest DNA Marker
λ-EcoT14 I/Bgl II digest DNA Marker λ-Hind III digest DNA Marker DL10,000 DNA Marker DL15,000 DNA Marker Supercoiled DNA Ladder Marker Wide Range DNA Ladder(50-10,000 bp) 1 Kb DNA Ladder(Dye Plus) |
使用λDNA digest DNA Marker（λ-BstP I digest、λ-EcoT14 I digest、λ-EcoT14 I/Bgl II digest和λ-Hind III digest）时应注意如下事项：
1. λDNA digest DNA Marker的原始末端之间经常由COS末端结合在一起，在电泳前进行热处理（60℃，5分钟），能使Marker的电泳图像变得更为清晰。
以λ-EcoT14 I digest DNA Marker为例，原始末端之间的COS末端的结合，影响19,329 bp和4,254 bp的DNA条带。如果电泳以后的图像中的4,254 bp的DNA条带亮度低于比其小的DNA片段时，那说明COS末端的结合情况比较严重。
2. 电泳时的加样孔宽度小于6 mm时，每次取5 μl制品电泳便可得到清晰条带。如果加样孔增宽，须适当增加Marker制品的加样量。
3. 对DNA电泳而言，Agarose的纯度对DNA条带的清晰度影响很大。因此，电泳时应尽量选用质量好的Agarose。
使用DNA Marker时应注意如下事项：
1. 电泳时的加样孔宽度小于6 mm时，每次取5 μl制品电泳便可得到清晰条带。如果加样孔增宽，须适当增加Marker制品的加样量。
2. 对DNA电泳而言，Agarose的纯度对DNA条带的清晰度影响很大。因此，电泳时应尽量选用质量好的Agarose。
3. 进行Agarose电泳时，Agarose的浓度与DNA片段的分离性能关系密切。Agarose浓度越大，对短片段DNA分离性能越好；反之，Agarose浓度越小，越有利于长片段DNA的分离。
使用Supercoiled DNA Ladder Marker时应注意如下事项：
1. 对DNA电泳而言，Agarose的纯度对DNA条带的清晰度影响很大，因此电泳时应尽量选择高质量的Agarose。
2. 为达到较好的电泳效果，建议使用150 V稳定电压进行电泳，并适当延长电泳时间。
页面更新：2020-05-11 14:19:10
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