| 体细胞治疗中患者自体血浆的制备 |
| 为了减少患者自体细胞培养过程中未知微生物的交叉感染，国家药监局在《人体细胞治疗研究和制剂质量控制技术指导原则》中已明确指明禁用同种异体血浆。从这个意义上来说在我国进行的CIK等细胞治疗中是应避免使用AB血浆的。患者自体血浆的合理应用不仅可以降低细胞的培养成本，也可以取得更佳的培养效果。 |
| 操作例： 1. 注采50 ml 外周血，置于2支50 ml的离心管 (A、B管) 中，分别加入6％HES (羟乙基淀粉) 5 ml。 2. 混匀后室温静置30分钟，红细胞和HES结合沉降于离心管底部。 3. 将A、B管上部含有白细胞的血浆移至新的离心管 (C管) 。 4. 将A和B管离心 (400 g,10 min) 后,取红细胞上部的少量血浆也加入C管。 5. 离心C管 (400 g,10 min),上清液移至新离心管 (D管)；C管下部的细胞作Ficoll分离PBMC用。 6. 将D管放入56 ℃水浴30分钟，灭活补体。 7. 离心 (800 g,20 min) 除去D管中絮状沉淀物，将上清移至新离心管 (E管) 。 8. E管中的上清 (约25 ml) 作为患者的自体血浆可在细胞培养中添加使用。 9. 使用G418进行抗性筛选。 |
| 注意： 6%HES (羟乙基淀粉) 是临床药品级别 (如北京费森尤斯卡比医药有限公司的产品：贺斯)，在最终的自体血浆中稍有混入，不存在安全问题，也不影响细胞的生长。 日本原产的GT-T551 H3培养基中只要加入上述的0.6％自体血浆，就可在淋巴细胞或DC细胞培养中获得更好的培养效果。 |
页面更新：2017-04-06 14:39:48
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