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机构用户解决方案

MEGALABEL
品牌 Code No. 包装量 价格 说明书 数量
Takara 6070 20 次 530 元
 
■ 制品内容 (20 次量)
Cloned T4 Polynucleotide Kinase (10 U/μl) 20 μl
5 × Exchange Reaction Buffer 100 μl
10 × Phosphorylation Buffer 50 μl
Control DNA (λ-BstP I Fragment 0.5 μg/μl) 20 μl
 
■ 制品说明
本试剂盒利用T4 Polynucleotide Kinase和[γ-32P]ATP,对粘性末端或平末端的DNA或RNA 的5’末端进行高效标记反应。使用本试剂盒之前,不需要对5’末端的磷酸基团进行去磷酸化处理,因为使用的kinase能使5’末端的磷酸与[γ-32P]ATP的γ-磷酸进行交换。另外,合成的单链或双链寡核苷酸的5’末端游离的OH基团都能通过Kinase反应被标记 (或者只是简单的磷酸化)。提供的两种反应液使交换反应和磷酸化反应都能高效进行,而且,两种方法都能得到大于106 cpm/pmol (5’-end) 的比活性。
 
保存
-20℃。
 
注意事项
1. 缓冲液可在室温融解。融解后立即置于冰中,使用前充分混匀。
2. 5×交换反应缓冲液于-20℃冻结保存时会有白色浑浊出现,但不影响反应效果。
3. 酶切得到的DNA片段需经乙醇沉淀等方法纯化。
4. 当用于交换反应的DNA在5 pmol以上 (约1,000 bp以上) 时,标记效率有时会低于106cpm/pmol。
5. 如果交换反应所用DNA低于500 bp时,标记效率有时会有所降低。
6. 若不进行放射线标记,仅使用本试剂盒做5’末端磷酸化反应时,反应体系中的[γ-32P] ATP可用5μl的10 mM ATP代替。
7. 磷酸化反应时的[γ-32P]可用[γ-35S] ATP替代。
 
 

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