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siRNA高效表达载体构建

★ 构建的同时可免费设计靶序列及其负对照的参考序列,节约您的设计实验时间
★ 可信的测序结果,保证与目的序列一致,免除您的后顾之忧
通过构建表达载体表达siRNA是多种siRNA制备方法中唯一有可能进行长期基因沉默研究的方法。我们可以根据您选定的siRNA序列,通过人工合成基因的方法将该序列克隆至Takara的pBAsi/pSINsi系列表达载体或Clontech的RNAi-Ready pSIREN系列表达载体中。您可以根据载体的特点及实验的需要选择其中任意一种载体进行构建。
 
■ 载体信息
Takara pBAsi/pSINsi系列
NO. 载体名称 长度(kb) 启动子 特点 载体种类
1
pBAsi-hH1
2.8
 Human H1
使用RNA Polymerase III (pol III)类启动子,既可以直接作为质粒转染细胞瞬时表达siRNA,也可以将“启动子*hairpin序列”切出后亚克隆至腺病毒载体,利用重组腺病毒进行siRNA的长期表达。          
质粒表达载体
2
pBAsi-hU6
2.9
 Human U6
3
pBAsi-mU6
3.0
 Mouse U6
4
pSINsi-hH1
6.4
 Human H1
以复制缺陷型逆转录病毒为基本骨架,使用RNA Polymerase III (pol III)类启动子,既可以直接作为质粒进行siRNA的瞬时表达,也可以包装成重组逆转录病毒进行siRNA的长期表达。同时带有真核筛选标记—新霉素基因。
逆转录病毒表达载体
5
pSINsi-hU6
6.5
 Human U6
6
pSINsi-mU6
6.6
 Mouse U6
 
Clontech RNAi-Ready pSIREN系列 (载体图谱请登录Clontech网站http://www.clontech.com查询)
NO. 载体名称 长度(kb) 启动子 特点 载体种类
1
pSIREN-Shuttle
3.1

Human U6
可直接作为质粒转染细胞,也可以将目的基因酶切后与腺病毒DNA连接,构建腺病毒。
质粒表达载体
2
pSIREN-RetroQ
6.4
可以进一步应用于构建逆转录病毒,通过与宿主细胞基因组DNA整合,实现siRNA在细胞内长期稳定表达。同时带有真核筛选标记—嘌呤霉素抗性基因。
逆转录病毒表达载体
3
pSIREN-RetroQ
DsRed-Express
6.6
带有红色荧光蛋白标记,可直接观察转染效果。既可作为质粒操作,也可以包装成逆转录病毒进行操作。
4
pSIREN-RetroQ-
TetH
7.4
通过潮霉素抗性基因进行阳性克隆细胞筛选。可与Tet-on&Tet-off表达系统结合使用。
5
pSIREN-RetroQ-
TetP
6.6
通过嘌呤霉素抗性基因进行阳性克隆细胞筛选。可与Tet-on&Tet-off表达系统结合使用。
6
pSIREN-RetroQ-
ZsGreen
6.6
带有绿色荧光蛋白标记,可直接观察转染效果。既可作为质粒操作,也可以包装成逆转录病毒进行操作。
 
■ 服务说明
1. 我们可以免费为您设计siRNA序列,您只需提供给我们靶基因序列或Gene ID即可。
2. 我们也可以使用其它公司的商品化siRNA表达载体为您进行siRNA表达载体构建服务。需要您在提供线性化载体 (或质粒载体) 的同时,提供详细的载体背景资料。
3. 由于构建的siRNA表达载体中插入的片段可以形成hairpin结构,因此可能会影响测序。如果我们对质粒测序结果不理想时,将对由质粒扩增得到的PCR产物进行测序。
4. 正常提供给您的质粒为普通质粒≥1 μg,如果您需要大量提取质粒或提取无内毒素质粒,请另外填写“Takara质粒提取服务委托书”。
 
■ 价格·实验周期
服务项目 收费标准 实验周期
        一个siRNA表达载体构建 1,500 元 10个工作日
        多个siRNA表达载体构建 请垂询  
 
■ 提供结果
电子版数据 (包括PDF版实验报告、测序彩色波形图、测序方向图、碱基序列图、酶切位点图等)、质粒等。
 
如果您需要进行此项服务,请填写“Takara siRNA高效表达载体构建服务委托书”(或请与本公司联系索取)。填写后通过传真或E-mail发送给我们或当地代理商。